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基因片段
克隆后,我应该选择多少个菌落来增加找到具有正确序列的克隆的机会?
对于标准复杂度序列,并且考虑到我们的错误率为 1/7500,如图所示,选择推荐的菌落数量时找到具有正确序列的菌落的成功率为 95%。
请注意,该建议只是一个起点。各种因素(如载体类型、序列复杂性和序列内容)都会影响菌落生长。在某些情况下,可能需要选择 2 到 3 倍的推荐菌落数量。

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是否将接头序列附加在我的序列两端?
对于接头打开的基因片段,会将通用接头合成至每个片段的两端。接头长度为 21-22 个核苷酸。具有这些接头的片段与多种组装方法兼容,即限制性酶切/连接、通路、Golden Gate 和 TOPO 克隆。
通过在接头内部添加限制性位点可移除接头。TOPO 克隆将发挥作用,但接头会保持打开状态。
接头序列
- 2021 年 8 月 9 日之前收到的订单,接头序列如下:
- 5' 接头:GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
- 3' 接头:AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
- 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'
- 2021 年 8 月 9 日至2021 年 11 月 1 日收到的订单,接头序列如下:
- 5' 接头:CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
- 3' 接头:AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
- 5' – CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT – 插入片段 – AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG – 3'
- 2021 年 11 月 2 日及之后收到的订单,接头序列如下:
- 5' 接头:CAATCCGCCCTCACTACAACCG
- 3' 接头:CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
- 5’ - CAATCCGCCCTCACTACAACCG – 插入片段 – CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA - 3’
*接头是添加到插入片段两端的短序列,该添加步骤是我们合成过程的一部分。在检验过程中也可获得不含这些接头的基因片段。
如果您对您的订单有任何问题,请联系我们:customersupport@twistbioscience.com
还有问题吗? 联系我们
接头打开的基因片段上使用的接头序列是什么?
- 2021 年 8 月 9 日之前收到的订单,接头序列如下:
- 5' 接头:GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
- 3' 接头:AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
- 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'
- 2021 年 8 月 9 日至2021 年 11 月 1 日收到的订单,接头序列如下:
- 5' 接头:CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
- 3' 接头:AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
- 5' – CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT – 插入片段 – AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG – 3'
- 2021 年 11 月 2 日及之后收到的订单,接头序列如下:
- 5' 接头:CAATCCGCCCTCACTACAACCG
- 3' 接头:CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
- 5’ - CAATCCGCCCTCACTACAACCG – 插入片段 – CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA - 3’
*接头是添加到插入片段两端的短序列,该添加步骤是我们合成过程的一部分。在检验过程中也可获得不含这些接头的基因片段。
如果您对订单有任何问题,请联系我们:{{[email protected]}}customersupport@twistbioscience.com
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