序列设计

重复结构、极端 GC 含量和均聚物是合成问题的主要影响因素。我们使用机器学习方法来确定成功概率。因此，在大多数情况下，序列排斥的原因并非单一。相反，复杂性或排斥源于多种特征的结合，这些特征共同导致了序列的复杂性。唯一的硬性规定如下：

• 避免均聚物 >= 14 bp

• 请勿包括 CcdB（II 型毒素-抗毒素系统）

如果遇到问题，我们建议删除或减少重复、极端 GC 含量的区域和均聚物。如果您的序列复杂、无法构建或包含与我们的内部流程相冲突的序列，我们将强调需要关注的区域。

我们的网站将接受氨基酸序列，并将其转化为 DNA 序列之后进行合成。请在“上传序列”页面中选择“氨基酸序列”选项。

请确保您输入的仅包含氨基酸单字母字符。我们仅支持标准的 20 个单字母代码字符。

氨基酸序列末尾的“*”表示终止密码子（我们不会自动添加终止密码子）

将根据您选择的密码子使用频率表，选择最常用的密码子。

如果您未找到所需的特定生物体，请联系 customersupport@twistbioscience.com 获得帮助。

克隆基因注意事项：并非所有的 Twist 表达载体在插入点上游都含有标准表达机制。我们建议您在选择需要的载体后，点击“下载序列”，再次检查最终质粒构建体的序列。

在我们的网站上提交您的基因序列后，将自动对基因序列进行组装可行性评分：

标准： 未发现错误。基因序列的总体复杂程度（如长度、GC 含量、同源性等）为“标准”。

复杂： 未发现错误。存在一些序列复杂性（如长度、GC 含量、同源性等），但我们预计在合成您的基因时不会出现任何问题。在极少数情况下，序列可能会有周转时间增加或制造失败的风险。

错误：基因序列存在错误。请单击序列，详细了解如何解决存在的错误。

不可接受： 该序列包含的元素会导致我们无法合成。请参阅错误信息提供的详细说明，或参考设计指南。

关于评分系统

我们的评分系统利用机器学习模型分析并结合多个序列参数（即总 GC 百分比、最大均聚物长度、最大重复长度、序列长度、重复密度等）。该模型使用我们的历史制造数据进行打磨，它可以更精确地估计基因和抗体产品的生产成功率

关于 ISSUE 信息

警告：经机器学习模型预测，与失败的风险相关。警告次数越多，越有可能导致“不可接受”得分。

错误： 与基因复杂性无关，可以通过改正基因设计来进行修复

客户可以选择订购寡核苷酸池、基因片段和克隆基因。

寡核苷酸池中的寡核苷酸（线性单链 DNA）大小范围为 20 - 300 bp。

基因片段为线性双链 DNA，其大小范围为 300 - 5,000 bp。

克隆基因为双链 DNA，已经被克隆到 Twist 的载体或客户提供的定制载体中。克隆基因大小范围为 300 - 5,000 bp。