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硅基 DNA 合成的强大力量

Custom antibody products in CHO help relieve bottlenecks by providing fast, high-quality antibodies ready for screening. Produced in ExpiCHO™ cells, antibodies are harvested and either filtered (Supernatant) or purified using Protein A (Fc-tag) or Ni-IMAC (His-tag).

 

  • New: Support for scFv, Fab, and VHH formats via His-tag purification.
  • High-quality antibodies from NGS-verified Twist Express Clonal Genes.
  • Integrated Characterization: Optional aSEC and Endotoxin testing now available to accelerate AI workflows.
  • Scalable Production: Available in 1 mL, 4 mL, 8 mL, and 24 mL scales

 

Twist Express 抗体可通过我们的集成电子商务应用程序轻松订购,只需提供可变(VH 和 VL)序列。请阅读我们的《快速入门指南》,了解订购提示。The antibodies can also be thawed using our handling guidelines (here)  for use in any functional or screening assays.

 

工作流程

我们利用表达基因减少了 TAT,扩大了细胞系产品范围,并提供了包括归一化、内毒素测试和等分在内的附加功能,从而增强了抗体产品,以满足您的蛋白质生产和纯化需求。

性能数据

图像描述:COVID 检测组合表达水平。Expression Panel of 66 IgGs generated from a COVID Antibody Discovery program. Average yields are represented by the bar while standard deviation is represented by the error bars for approximately 4 replicates of 1 mL expression volumes.

 

Twist Express 抗体、CHO 产品

硅基 DNA 合成的强大力量

Custom antibody products in HEK293 help relieve bottlenecks by providing fast, high-quality antibodies ready for screening. Produced in Expi293™ cells, antibodies are harvested and either filtered (Supernatant) or purified using Protein A (Fc-tag) or Ni-IMAC (His-tag).

  • New: Support for scFv, Fab, and VHH formats via His-tag purification.
  • High-quality antibodies from NGS sequence-verified Twist Express Clonal Genes.
  • Integrated Characterization: Optional aSEC and Endotoxin testing now available to accelerate AI workflows.
  • Scalable Production: Available in 1 mL, 4 mL, 8 mL, and 24 mL scales


Twist Express 抗体可通过我们的集成电子商务应用程序轻松订购,只需提供可变(VH 和 VL)序列。请阅读我们的《快速入门指南》,了解订购提示。The antibodies can also be thawed using our handling guidelines (here)  for use in any functional or screening assays. 

 

工作流程

我们利用表达基因减少了 TAT,扩大了细胞系产品范围,并提供了包括归一化、内毒素测试和等分在内的附加功能,从而增强了抗体产品,以满足您的蛋白质生产和纯化需求。

 

性能数据

图像描述:在抗体产生之后,纯化抗体并测定产率。Of the 518 antibodies produced, 482 passed size and purity QC tests-409 yielded more than 100 ug per antibody.

 

Twist Express Antibodies, 293 Product Offering

抗体开发的完整解决方案

对开发抗体的科学家和团队而言,Twist 端到端高通量抗体生产和表征平台这一解决方案,可整合人工智能/机器学习 (AI/ML) 现成的数据集成、灵活的项目设计以及值得信赖的制造精度。

在不制造单一蛋白质的情况下在几周内获得表征数据

无需湿实验室即可训练发现算法

Twist 创建了优质的标准化数据集,可直接用于人工智能和机器学习模型。从基因合成、表达到检测结果,每一步都在内部进行,这样您就可以专注于设计下一个突破性的抗体,而无需设备、实验室、空间或专业人员方面的投资。

抗体生成:

可开发性:

结合评估:

*标准订单、额外 QC、缓冲液更换和抗体完成增加了额外的周转时间。

**应要求使用 DPBS pH 7.4 或 PBS pH 6 进行自动缓冲液交换。样本也可以归一化为 0.25、0.50 或 0.75 mg/mL。可添加 0.2 μm 过滤步骤。

***周转时间(TAT)因样本数量而异。

本文档可为您提供有关 Twist Bioscience 表达抗体 - CHO 的详细信息,包括产品规格、定制信息等。
本文档可为您提供有关 Twist Bioscience 表达抗体 - HEK293 的详细信息,包括产品规格、定制信息等

Twist 高通量 IgG 的建议处理和储存说明
本快速指南可指导您在 Twist 的订购平台上完成序列准备和下达订单。

Twist 的平台旨在帮助候选抗体以稳定方式表达,并产生针对特定抗原的潜在抗体突变。了解 Twist 在本宣传单中为您提供的表达数据。

Twist 表达抗体:高通量定制抗体生产

利用 Twist 的高通量抗体生产和 SPR 筛选技术进行深度汇集挖掘,发现超广泛的冠状病毒中和抗体

订购流程

To place an order through our eCommerce portal,simply prepare your trimmed variable region sequences according to our Quick start and paste them into our upload template along with the corresponding antibody names. Once the file is uploaded, the portal will ask for the IgG subtype, light chain type, expression vectors (Twist provided or custom), and to specify the Kozak and leader sequences to use. Once the sequences are screened and reviewed, simply select the scale (1 mL vs. 8 mL), grade (pure vs. supernatant), elution buffer, buffer exchange (optional), and delivery format to complete your order! 

 

常规问题

对于用于抗体生产的合成克隆基因,Twist 提供克隆基因甘油储备液。在抗体生产过程中,DNA 因转染而消耗;但是,甘油储备液保存 DNA 可与生产的抗体一同交付。请参阅从甘油储备液中制备新鲜 DNA 的方案。

前导或分泌信号序列在翻译过程的早期充当细胞机器结合的肽信号。这有助于将翻译复合物正确定位到内质网,在内质网中抗体链可以进入分泌通路以进行蛋白质组装和细胞分泌。前导序列在蛋白质组装过程中会被切割,因此不构成最终蛋白质。在使用我们的 pTwist IgG 表达载体时,Twist 建议重链和轻链使用以下前导序列,因为这些序列已在 Expi293™ 和 ExpiCHO™ 细胞系中使用我们的 pTwist 载体进行了测试和验证:

VH:MRAWIFFLLCLAGRALA

VL:MRAWIFFLLCLAGRALA

Kozak 序列将起始前复合体 (PIC) 和核糖体引导到翻译起始位点(起始密码子),并介导核糖体组装,确保对正确的蛋白质序列进行翻译。

共有 Kozak 序列通常被认为是 GCCGCCACCATGG,其中 ATG 是起始密码子(通常是信号序列的起始)。Twist 推荐使用起始密码子 ATG 上游的 GCCGCCACC 版本。

您可以使用 A 蛋白或 G 蛋白固相进行纯化,两者可与抗体的 FC 区域结合,具体取决于 IgG 的种类和同种型。或者,您可以使用固定化抗原(全长或短肽抗原)来纯化抗体。该方法将取决于抗体的下游应用及特异性。

Twist 使用的是行业标准细胞系 Thermo Scientific Expi293™ 和 Thermo Scientific ExpiCHO™

当客户想要使用自己的 Fc 区序列(IgG3、小鼠 IgG 或修饰的Fc)或需要表达其他类型的 Fc 融合抗体时,可以选择使用 pTwist CMV BG WPRE Neo 表达载体。

请记得在编码序列末尾加入终止密码子。If you have any design questions, please email igg@twistbioscience.com for help with your custom request

研究表明,一旦 IgG 进入循环,重链的 C 末端赖氨酸残基(存在于所有 IgG 同种型上)就会被切割掉。研究还表明,赖氨酸一旦被切割掉就不会对相关功能产生影响,而且它的存在实际上会抑制抗体充分发挥细胞毒性的潜力: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4622059/

 

这种全长 IgG 中的半胱氨酸与 LC 恒定区形成二硫键,而 VHH-Fc 融合构建体中不存在。

请确保序列格式如下所示,以便上传可变区域:

  • 去除信号头肽(如果使用 pTwist 载体 + Twist 推荐信号头肽)
  • 可变区域不应以任何 CH1 起始序列结束
  • 如果您的 ORF 与您的插入位点一致,序列可以分为三个

You can find the pricing table for our custom antibody products in your account by clicking here.

If you need to contact your Account Manager regarding pricing, their contact information is available in eCommerce under Account.

   交付形式

我们使用市售的 PBS,请根据要求与客户共享产品样本信息:

  • PBS 7.4 目录号 21-031-CM,Corning
  • PBS 6.0 目录号 P1760,Teknova

Twist 在还原条件下检测每种抗体产品的产量 (µg)、纯度 (%) 和大小 (kDa)。每个抗体将通过 LabChip (CE-SDS) 进行检测,以测定单个重链和轻链的纯度和大小。产量根据 A280 读数进行定量。上清液样本使用滴度测定法进行定量。在最终文件中,除了纯度百分比、重链和轻链大小外,还会报告每个纯化抗体的体积、产量和浓度值。上清液记录文件中将提供抗体滴度表达水平,包含低、中或高三个表达水平。

1 mL = ~220 uL 体积,15-300 µg

8 mL = ~750 uL 体积,15-3000 µg

  • 96 深孔板 - 可提供定制孔板
  • 1.4 mL 微型管架
  • 2 mL 管
  • 4 mL 管
  • 10 mL 管(仅适用于 8 mL 上清液)

序列设计的资源和指导

  1.  abYsis 可对一种或多种抗体进行综合、全面和附有注释的序列评估。abYsis 对抗体序列进行了全面的区域细分,可快速确定可变区的起点和终点。并以列表的形式提供了对先导序列、FWK 序列和 CDR 序列以及柄端序列或恒定区序列的划分。

  2. 使用生物信息学程序将 abYsis 提供的注释应用于序列,有助于可视化和分离可变区。下面是导入 Geneious Prime 软件平台且应用了 abYsis 注释的序列示例。

  1. One additional option that may provide comprehensive breakdown of    leader, variable, and constant regions is ANARCI. 结果分析会以红色突出显示确切的可变区序列,接下来您可将此上传到我们电子商务网站上的抗体应用程序。ANARCI 还提供了有关轻链结构域类型和序列种属的详细信息。

  2. 请记住,可变区序列不能以甲硫氨酸 (M) 开头。如果您将上传以氨基酸 M 或核苷酸 ATG 开头的序列,并且计划使用 pTwist 载体,请联系我们的支持人员寻求帮助。

  3. 考虑到二硫键和其他特征之间的差异,将可变结构域从一个物种重组到另一个物种可能会比较复杂。默认情况下,Twist 电子商务平台不会更正任何这些问题。通常需要您自行说明和检查这些与重组相关的问题。如果您需要帮助,请联系我们的支持团队。

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