定制载体存储
将您自己的载体发送给我们,我们会在几天内将序列完美的 DNA 导入到您的载体中。
克隆 DNA 的最快方法。使用 Twist 的目录载体,在短短 4 个工作日内*就能获得克隆 DNA,可立即您的 Twist 账户中使用这些载体。
Twist 克隆载体在插入位点附近不含限制性位点 如果您打算使用限制性酶提取插入物,请确保在插入物序列中添加相关位点。最好使用“下载序列”功能检查您要订购的结构
带有 pMB1 复制源的高拷贝克隆载体。Twist 正向和反向引物位于插入位点的两侧,便于扩增产物。存在 M13 正向和反向引发位点,以用于插入测序。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| pTwist Amp | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
带有 pMB1 复制源的高拷贝克隆载体。Twist 正向和反向引物位于插入位点的两侧,便于扩增产物。存在 M13 正向和反向引发位点,以用于插入测序。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| pTwist Chlor | 0 - 7000 kbp |
Chloramphenicol
高
带有 p15A 复制源的中等拷贝克隆载体。Twist 正向和反向引物位于插入位点的两侧,便于扩增产物。存在 M13 正向和反向引发位点,以用于插入测序。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| pTwist Amp MC | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
中
带有 p15A 复制源的中等拷贝克隆载体。Twist 正向和反向引物位于插入位点的两侧,便于扩增产物。存在 M13 正向和反向引发位点,以用于插入测序。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| pTwist Chlor MC | 0 - 7000 kbp |
Chloramphenicol
中
带有 p15A 复制源的中等拷贝克隆载体。Twist 正向和反向引物位于插入位点的两侧,便于扩增产物。存在 M13 正向和反向引发位点,以用于插入测序。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| pTwist Kan MC | 0 - 7000 kbp |
Kanamycin
中
pTwist ENTR 可利用 Gateway™ 克隆系统将一个或多个基因快速克隆到几乎任何蛋白质表达系统中。有了入门克隆后,您就可以将您的目标基因重组组合到适合 Gateway® 技术使用的各种表达载体中。基因合成产物克隆在 attL1 和 attL2 重组位点之间。如果本克隆的预期用途是哺乳动物表达,我们建议使用 pTwist ENTR Kozak,以提高哺乳动物表达水平。本载体含有 pMB1 复制源,可获得较高的质粒产量,还含有用于插入测序的 M13 正向和反向引物位点。Gateway™ & Gateway® Technology are registered trademarks of Thermo Fisher Scientific.
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| pTwist ENTR | 0 - 7000 kbp |
Kanamycin
高
pTwist ENTR Kozak 可利用 Gateway™ 克隆系统将基因快速克隆到几乎任何蛋白质表达载体中。pTwist ENTR Kozak 用于增强哺乳动物表达。克隆位点设计在适当的阅读框中,可与最常用的哺乳动物表达载体网关中的 N 端和 C 端融合标记配合使用。基因合成产物克隆在最小 Kozak 位点之后的 attL1 和 attL2 重组位点之间,以增强表达。本载体含有 pMB1 复制源,可获得较高的质粒产量,还含有用于插入测序的 M13 正向和反向引物位点。Gateway™ & Gateway® Technology are registered trademarks of Thermo Fisher Scientific.
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| pTwist ENTR Kozak | 0 - 7000 kbp |
Kanamycin
高
Twist 高拷贝克隆载体的更新版本,带有 pMB1 复制源和卡那霉素抗性标记。Twist 正向和反向引物位于插入位点的两侧,便于扩增产物。存在 M13 正向和反向引发位点,以用于插入测序。
改进:| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| pTwist Kan HC v2 | 0 - 7000 kbp |
Kanamycin
高
pUC19 是一种常用的具有氨苄青霉素抗性的高拷贝克隆载体,由加利福尼亚大学的 Joachim Messing 等人开发。它包含 LacZ 基因和多个克隆位点。插入位点:
| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| HindIII_XbaI | 0 - 7000 kbp |
| HindIII_SphI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
CMV 驱动的表达载体,用于在哺乳动物细胞中瞬时表达。本载体含有一个氨苄青霉素抗性盒,可在大肠杆菌中生长和维持。由于没有哺乳动物选择标记,本载体的整体尺寸有所减小。转录终止是通过多克隆位点 3' 处的 SV40 多腺苷酸化信号完成的。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| NotI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| HindIII_NheI | 0 - 7000 kbp |
| HindIII_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
一种用于在哺乳动物细胞中进行高水平的瞬时表达的、CMV 驱动的表达载体,包含一个氨苄青霉素抗性盒,可在大肠杆菌中生长和维持。OriP 在 EBNA 转化的 HEK-293 细胞中驱动质粒复制,从而促进更高水平的蛋白质表达。转录终止是通过多克隆位点 3' 处的 SV40 多腺苷酸化信号完成的。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| NotI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| HindIII_NheI | 0 - 7000 kbp |
| HindIII_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
用于在大肠杆菌中表达的 T7 RNA 聚合酶驱动转录载体。该载体缺少核糖体结合位点和 ATG 起始密码子,旨在通过克隆 DNA 携带的翻译信号表达蛋白质。载体功能:C 端 His-Tag® 序列的乳糖抑制剂/乳糖操作符,可抑制大肠杆菌中的转录。可以通过添加乳糖或异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)来诱导表达,在与辅助噬菌体共转染后,产生含有与编码链相对应的单链 DNA 的病毒体。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| BglII_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_NotI | 0 - 7000 kbp |
| BamHI_HindIII | 0 - 7000 kbp |
| BamHI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| SacI_HindIII | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
中
用于在大肠杆菌中表达的 T7 RNA 聚合酶驱动转录载体。该载体缺少核糖体结合位点和 ATG 起始密码子,旨在通过克隆 DNA 携带的翻译信号表达蛋白质。载体功能:C 端 His-Tag® 序列的乳糖抑制剂/乳糖操作符,可抑制大肠杆菌中的转录。可以通过添加乳糖或异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)来诱导表达,在与辅助噬菌体共转染后,产生含有与编码链相对应的单链 DNA 的病毒体。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| BamHI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_NotI | 0 - 7000 kbp |
| BglII_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| BamHI_HindIII | 0 - 7000 kbp |
| SacI_HindIII | 0 - 7000 kbp |
Kanamycin
中
用于在大肠杆菌中表达蛋白质的转录/翻译载体。该载体包含核糖体结合位点和 ATG 起始密码子,旨在通过克隆 DNA 携带的翻译信号表达蛋白质。相对于 GGATCC BamH I 克隆位点的翻译阅读框为 GGA。载体功能:N 端和可选的 C 端 His•Tag® 序列内部 T7•Tag® 序列凝血酶裂解位点乳糖抑制物/乳糖操作符,可抑制大肠杆菌中的转录。可以通过添加乳糖或异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)来诱导表达,在与辅助噬菌体共转染后,产生含有与编码链相对应的单链 DNA 的病毒体。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| NcoI_XhoI_no_HIS_no_thrombin | 0 - 7000 kbp |
| SacI_HindIII | 0 - 7000 kbp |
| BamHI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| NdeI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| BamHI_HindIII | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_NotI | 0 - 7000 kbp |
Kanamycin
中
用于在大肠杆菌中表达蛋白质的转录/翻译载体。该载体包含核糖体结合位点和 ATG 起始密码子,旨在通过克隆 DNA 携带的翻译信号表达蛋白质。相对于 GGATCC BamH I 克隆位点的翻译阅读框为 GAT 载体特征:N 端 S•Tag™ 序列 C 端 His•Tag® 序列 凝血酶裂解位点乳糖抑制剂/乳糖操作符,可抑制大肠杆菌中的转录。可以通过添加乳糖或异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)来诱导表达,在与辅助噬菌体共转染后,产生含有与编码链相对应的单链 DNA 的病毒体。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| EcoRI_NotI | 0 - 7000 kbp |
| BamHI_HindIII | 0 - 7000 kbp |
| BamHI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| SacI_HindIII | 0 - 7000 kbp |
| NdeI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
Kanamycin
中
慢病毒表达质粒,可用于将基因稳定整合到分裂细胞和非分裂细胞中。该质粒基于常用的 pCCL 慢病毒主链。SFFV 启动子用于驱动转基因表达。这是第三代慢病毒,可使用第二代或第三代包装混合进行包装。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| BamHI_SpeI | 0 - 7000 kbp |
| BamHI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| MluI_SpeI | 0 - 7000 kbp |
| SpeI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| MluI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| BamHI_MluI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
慢病毒表达质粒,可用于将基因稳定整合到分裂细胞和非分裂细胞中。该质粒基于常用的 pCCL 慢病毒主链。SFFV 启动子用于驱动转基因表达。该质粒中还含有抗生素嘌呤霉素基因,其表达由 SSFV 启动子通过 EMCV IRES 驱动。这是第三代慢病毒,可使用第二代或第三代包装混合进行包装。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| BamHI_MluI | 0 - 7000 kbp |
| BamHI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| SpeI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| MluI_XhoI | 0 - 7000 kbp |
| BamHI_SpeI | 0 - 7000 kbp |
| MluI_SpeI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
CMV 驱动的表达载体,用于在哺乳动物细胞中瞬时表达。除 CMV 启动子外,本载体还包含一个β球蛋白内含子,该内含子已被证明具有增强基因表达的能力。本载体含有一个氨苄青霉素抗性盒,可在大肠杆菌中生长和维持。由于没有哺乳动物选择标记,本载体的整体尺寸有所减小。转录终止是通过多克隆位点 3' 处的 SV40 多腺苷酸化信号完成的。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| NotI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_XbaI | 0 - 7000 kbp |
| XhoI_XbaI | 0 - 7000 kbp |
| XhoI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_XbaI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
人类延伸因子α启动子(EF1α)驱动的中等水平瞬时哺乳动物表达载体。本载体含有一个氨苄青霉素抗性盒,可在大肠杆菌中生长和维持。由于没有哺乳动物选择标记,本载体的整体尺寸有所减小。转录终止是通过多克隆位点 3' 处的 SV40 多腺苷酸化信号完成的。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| HindIII_NheI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| HindIII_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
人类延伸因子α启动子(EF1α)驱动的中等水平哺乳动物表达载体,用于通过嘌呤霉素选择产生稳定的细胞系。本载体含有氨苄青霉素抗性盒,可在大肠杆菌中生长和维持。转录终止是通过多克隆位点 3' 处的 SV40 多腺苷酸化信号完成的。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| EcoRI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| HindIII_NheI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| HindIII_BamHI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
一种用于在哺乳动物细胞中进行高水平的瞬时表达的、CMV 驱动的表达载体,包含一个氨苄青霉素抗性盒,可在大肠杆菌中生长和维持。本载体含有一个潮霉素哺乳动物选择标记,用于产生稳定的哺乳动物克隆。转录终止是通过多克隆位点 3' 处的 SV40 多腺苷酸化信号完成的。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| EcoRI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_XbaI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| HIndIII_NheI | 0 - 7000 kbp |
| HindIII_BamHI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
一种用于在哺乳动物细胞中进行高水平的瞬时表达的、CMV 驱动的表达载体,包含一个氨苄青霉素抗性盒,可在大肠杆菌中生长和维持。本载体含有一个嘌呤霉素哺乳动物选择标记,用于产生稳定的哺乳动物克隆。转录终止是通过多克隆位点 3' 处的 SV40 多腺苷酸化信号完成的。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| EcoRI_NheI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| HIndIII_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| HindIII_NheI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_NheI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
CMV 驱动的表达载体用于在哺乳动物细胞中瞬时表达,可提供极高水平的转基因表达。它可用于悬浮适配细胞和粘附细胞,进行瞬时蛋白质表达。该载体还可用作 G-418 可选择表达质粒,用于构建稳定的细胞系。除 CMV 启动子外,本载体还含有 WPRE,它已被证明能够增强转基因的表达。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| NotI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| HindIII_BamHI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_XbaI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV hIgL2 是一种表达载体,包含人类 lambda 2 轻链恒定区域。当与克隆到 pTwist hIgG1/2/4 S228P 中的重链可变区共转染到哺乳动物细胞中时,便能生成目标抗体。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Lambda_TAG | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV hIgG2 是一种表达载体,包含人类 IgG2 同种型恒定区域,其效应功能极低。当与克隆到 pTwist hIgK 或 hIgL2 中的轻链可变区共转染到哺乳动物细胞中时便能生成目标抗体。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| HuIgG2Fc_TAG | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV hIgG1-Fc 是一种表达载体,包含与人类 IgG1 同种型的 CH2 和 CH3 区域融合的 G4S 连接器。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| VHHFc_TAG | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV hIgK 是一种表达载体,包含人类 kappa 轻链恒定区域。当与克隆到 pTwist hIgG1/2/4 S228P 中的重链可变区共转染到哺乳动物细胞中时,便能生成目标抗体。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Kappa_TAG | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV hIgG1 是一种表达载体,包含人类 IgG1 同种型恒定区域。当与克隆到 pTwist hIgK 或 hIgL2 中的轻链可变区共转染到哺乳动物细胞中时便能生成目标抗体。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| HuIgG1Fc_TAG | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
CMV 驱动的表达载体用于在哺乳动物细胞中瞬时表达,可提供极高水平的转基因表达。本载体可用于悬浮适配细胞和粘附细胞,进行瞬时蛋白质表达,也可用作 G-418-可选择表达质粒,用于稳定细胞系工程。除 CMV 启动子外,本载体还含有一个β球蛋白内含子和一个 WPRE,这两个基因已被证明能够增强转基因的表达。对于 IgG 表达,本载体可用于全长或单链表达,其中所需的 Fc 区域与可用的 IgG 载体不同。这样就可以定制 Fc 序列区域,如小鼠或兔子的 Fc 区域。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| NotI_XbaI | 0 - 7000 kbp |
| XhoI_ClaI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_XbaI | 0 - 7000 kbp |
| XhoI_XbaI | 0 - 7000 kbp |
| NotI_ClaI | 0 - 7000 kbp |
| EcoRI_ClaI | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV hIgG4 S228P 是一种表达载体,包含人类 IgG4 S228P 同种型恒定区域。S228P 突变通过稳定 IgG4 分子核心铰链中的二硫键来减少 Fab 臂交换。当与克隆到 pTwist hIgK 或 hIgL2 中的轻链可变区共转染到哺乳动物细胞中时便能生成目标抗体。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| HuIgG4_TAG | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV hIgG2-Fc 是一种表达载体,包含与人 IgG2 同种型的 CH2 和 CH3 区域融合的 G4S 连接器,其效应功能极低。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| NotI_GS-hIgG2-FcFusionTA | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
用于在大肠杆菌中表达的 T7 RNA 聚合酶驱动转录载体。该载体缺少 ATG 起始密码子和终止密码子,旨在通过克隆 DNA 所携带的翻译信号表达蛋白质。载体功能:抑制大肠杆菌转录的乳糖抑制子/乳糖操作符。可以通过添加乳糖或异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)来诱导表达,在与辅助噬菌体共转染后,产生含有与编码链相对应的单链 DNA 的病毒体。插入位点:T7-lacO-RBS - 不含 ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。T7-lacO(无 RBS)- 不含 RBS、ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。自定义启动子-RBS - 不包含启动子、RBS、ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| T7-lacO-RBS | 0 - 7000 kbp |
| T7-lacO (no RBS) | 0 - 7000 kbp |
| Custom promoter-RBS | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
中
用于在大肠杆菌中表达的 T7 RNA 聚合酶驱动转录载体。该载体缺少 ATG 起始密码子和终止密码子,旨在通过克隆 DNA 所携带的翻译信号表达蛋白质。载体功能:抑制大肠杆菌转录的乳糖抑制子/乳糖操作符。可以通过添加乳糖或异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)来诱导表达,在与辅助噬菌体共转染后,产生含有与编码链相对应的单链 DNA 的病毒体。插入位点:T7-lacO-RBS - 不含 ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。T7-lacO(无 RBS)- 不含 RBS、ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。自定义启动子-RBS - 不包含启动子、RBS、ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| T7-lacO (no RBS) | 0 - 7000 kbp |
| Custom promoter-RBS | 0 - 7000 kbp |
| T7-lacO-RBS | 0 - 7000 kbp |
Kanamycin
中
用于在大肠杆菌中表达的 T7 RNA 聚合酶驱动转录载体。该载体缺少 ATG 起始密码子和终止密码子,旨在通过克隆 DNA 所携带的翻译信号表达蛋白质。与辅助噬菌体共同转染后,产生含有与编码链相对应的单链 DNA 的病毒。在 3' UTR 插入位点的 3' 端适当添加线性化酶后,本载体可用于 IVT:T7-RBS - 不含 ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。T7(无 RBS)- 不含 RBS、ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。自定义启动子-RBS - 不包含启动子、RBS、ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| T7-RBS | 0 - 7000 kbp |
| T7 (no RBS) | 0 - 7000 kbp |
| Custom promoter-RBS | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
中
用于在大肠杆菌中表达的 T7 RNA 聚合酶驱动转录载体。该载体缺少 ATG 起始密码子和终止密码子,旨在通过克隆 DNA 所携带的翻译信号表达蛋白质。与辅助噬菌体共同转染后,产生含有与编码链相对应的单链 DNA 的病毒。在 3' UTR 插入位点的 3' 端适当添加线性化酶后,本载体可用于 IVT:T7-RBS - 不含 ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。T7(无 RBS)- 不含 RBS、ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。自定义启动子-RBS - 不包含启动子、RBS、ATG 和终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| T7 (no RBS) | 0 - 7000 kbp |
| Custom promoter-RBS | 0 - 7000 kbp |
| T7-RBS | 0 - 7000 kbp |
Kanamycin
中
Twist 版本的 pcDNA3.1(+)™。CMV 驱动的表达载体用于在哺乳动物细胞中瞬时表达,可提供极高水平的转基因表达。它可用于悬浮适配细胞和粘附细胞,进行瞬时蛋白质表达。此外,还含有 T7 启动子、牛生长激素(BGH)多腺苷酸化信号和终止信号,以便在体外转录应用中提高 mRNA 的稳定性。插入位点:默认 - 不包含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。默认插入位点两侧有 BamHI 和 NotI 识别位点,用于限制性酶消化,将插入物与主链分离。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
Twist 版本的 pcDNA3.4(+)™。CMV 驱动的表达载体用于在哺乳动物细胞中瞬时表达,可提供极高水平的转基因表达。它可用于悬浮适配细胞和粘附细胞,进行瞬时蛋白质表达。除 CMV 启动子外,本载体还含有 WPRE,它已被证明能够增强转基因的表达。HSV TK polyA 信号和终止信号的存在可增强 mRNA 的稳定性。插入位点:默认 - 不包含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。默认插入位点两侧有 Esp3I 和 EcoRV 识别位点,用于限制性酶消化,将插入物与主链分离。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
用于在大肠杆菌中表达的 T7 RNA 聚合酶驱动转录载体。该载体缺少核糖体结合位点和 ATG 起始密码子,旨在通过克隆 DNA 携带的翻译信号表达蛋白质。载体功能:C 端 His-Tag® 序列。与辅助噬菌体共同转染后,产生含有与编码链相对应的单链 DNA 的病毒。插入位点:pET-23(+)_default - 不含 RBS 和 ATG。这些信息应在订购时添加到插页中。在目标基因和 C 端 His•Tag® 序列之间的 AAALE 肽连接子序列上添加
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| pET-23(+)_default | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
中
慢病毒表达质粒,可用于将基因稳定整合到分裂细胞和非分裂细胞中。该质粒基于常用的 pLKO 慢病毒主链。CMV 启动子用于驱动转基因的表达。该质粒还含有一个可选择抗生素箭毒素的基因,其表达由人类磷酸甘油酸激酶 1(PGK1)启动子驱动。这是第三代慢病毒,可使用第二代或第三代包装混合进行包装。插入位点:默认 - 不包含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。默认插入位点两侧有 NheI 和 EcoRV 识别位点,用于限制性酶消化,将插入物与主链分离。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
慢病毒表达质粒,可用于将基因稳定整合到分裂细胞和非分裂细胞中。该质粒基于常用的 pLKO 慢病毒主链。CMV 启动子用于驱动转基因的表达。该质粒还含有一个可以选择抗生素嘌呤霉素的基因,其表达由人类磷酸甘油酸激酶 1(PGK1)启动子驱动。这是第三代慢病毒,可使用第二代或第三代包装混合进行包装。插入位点:默认 - 不包含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。默认插入位点两侧有 NheI 和 EcoRV 识别位点,用于限制性酶消化,将插入物与主链分离。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
慢病毒表达质粒,可用于将基因稳定整合到分裂细胞和非分裂细胞中。该质粒基于常用的 pLKO 慢病毒主链。紧密的 TRE 启动子用于驱动低水平的转基因表达。该质粒还含有一个允许使用抗生素嘌呤霉素的基因,其表达由目标基因下游的人类磷酸甘油酸激酶 1(PGK1) 启动子驱动。这是第三代慢病毒,可使用第二代或第三代包装混合进行包装。插入位点:No_tag - 不含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些信息应在订购时添加到插页中。6xHis_tag - 不包含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。包含 C 端 6xHis•Tag®
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| No_tag | 0 - 7000 kbp |
| 6xHis_tag | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
慢病毒表达质粒,可用于将基因稳定整合到分裂细胞和非分裂细胞中。该质粒基于常用的 pLKO 慢病毒主链。鸡-β-肌动蛋白(CAG)启动子用于驱动转基因表达。该质粒还含有一个允许选择抗生素嘌呤霉素的基因,其表达由人类磷酸甘油酸激酶 1(PGK1)启动子驱动。这是第三代慢病毒,可使用第二代或第三代包装混合进行包装。插入位点:默认 - 不包含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。默认插入位点两侧有 BstXI 和 FseI 识别位点,用于限制性酶消化,将插入物与主链分离。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
慢病毒表达质粒,可用于将基因稳定整合到分裂细胞和非分裂细胞中。该质粒基于常用的 pLKO 慢病毒主链。人类延伸因子α启动子(EF1α)用于驱动转基因表达。基因的表达也受基因 3'- 端 WPRE 的调控。该质粒还含有一个 CMV 驱动的报告基因 EGFP,它通过 T2A 肽连接子与嘌呤霉素抗性相连。这是第三代慢病毒,可使用第二代或第三代包装混合进行包装。插入位点:WPRE_EGFP_T2A_Puro - 不含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。T2A_Puro - 不含 kozak 序列、起始密码子、WPRE 和报告基因 EGFP。这些内容应该在订购期间添加到插页中。本插入位点位于 T2A 的上游。终止密码子中不应添加插入物,否则会影响嘌呤霉素的表达。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| T2A_Puro | 0 - 7000 kbp |
| WPRE_EGFP_T2A_Puro | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
慢病毒表达质粒,可用于将基因稳定整合到分裂细胞和非分裂细胞中。该质粒基于常用的 pLKO 慢病毒主链。SDFV 启动子用于驱动转基因表达。该质粒还含有一个允许选择抗生素嘌呤霉素的基因,其表达由人类磷酸甘油酸激酶 1(PGK1)启动子驱动。这是第三代慢病毒,可使用第二代或第三代包装混合进行包装。插入位点:默认 - 不包含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。默认插入位点两侧有 NheI 和 XbaI 识别位点,用于限制性酶消化,将插入物与主链分离。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
鸡-β-肌动蛋白(CAG 启动子)驱动的表达载体,可在包括干细胞在内的多种哺乳动物细胞系中长期稳定地表达蛋白质。它可用于悬浮适配细胞和粘附细胞,进行瞬时蛋白质表达。除 CAG 启动子外,本载体还包含目标基因上游的嵌合内含子和下游的 WPRE,以增强转基因的表达。HSV TK polyA 信号和终止信号的存在可增强 mRNA 的稳定性。插入位点:默认 - 不包含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。默认插入位点两侧有 BstXI 和 FseI 识别位点,用于限制性酶消化,将插入物与主链分离。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
用于在哺乳动物细胞中瞬时表达的 CMV 表达载体,可提供极高的转基因表达水平。它可用于悬浮适配细胞和粘附细胞,进行瞬时蛋白质表达。除 CMV 启动子外,本载体还包含目标基因上游的β-球蛋白内含子和下游的 WPRE ,以增强转基因的表达。HSV TK polyA 信号和终止信号的存在可增强 mRNA 的稳定性。插入位点:默认 - 不包含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。默认插入位点两侧有 BstXI 和 FseI 识别位点,用于限制性酶消化,将插入物与主链分离。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
人类延伸因子α启动子(EF1α)驱动的中等水平哺乳动物表达载体,用于通过新霉素选择产生稳定的细胞系。本载体含有氨苄青霉素抗性盒,可在大肠杆菌中生长和维持。转录终止是通过多重克隆位点下游的 HSV TK polyA 信号完成的。插入位点:默认 - 不包含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中。默认插入位点两侧有 NheI 和 XbaI 识别位点,用于限制性酶消化,将插入物与主链分离。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
Twist 的体外转录(IVT)载体是以 pTwist Kan High Copy v2 主链为基础的。该载体的特点是,人类 β-球蛋白(hBG)5'UTR 位于目标基因的上游,hBG 3'UTR 位于下游。3' UTR 的 3' 端包含一个 50A 的 polyA 尾部。BspQI 可使质粒线性化,直接暴露 polyA 尾部。在 polyA 尾端的下游有多个钝酶切割位点,以提高灵活性。插入位点:默认 - 不包含 kozak 序列、起始密码子或终止密码子。这些内容应该在订购期间添加到插页中
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0 - 7000 kbp |
Kanamycin
高
"pTwist PICZα is a yeast expression vector, a Twist Bioscience rendition of pPICZα(TM). It utilizes the methanol-inducible AOX1 promoter for controlled gene expression. The gene of interest is in-frame with the α-factor secretion signal, facilitating the excretion of the expressed protein. The Zeocin resistance marker enables selection in both E. coli and Pichia. 插入位点:Default - In frame with α-factor secretion signal on the N-terminus with c-myc epitope and 6x His tag on the c-terminus, flanked by EcoRI and NotI for excision of the gene of interest His Tag - In frame with α-factor secretion signal on the N-terminus with 6x His tag on the c-terminus. flanked by EcoRI and SalI for excision of the gene of interest No Tag - In frame with α-factor secretion signal on the N-terminus with a stop codon on the 3'-end"
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0.3 – 5.0 kbp |
| His Tag | 0.3 – 5.0 kbp |
| No Tag | 0.3 – 5.0 kbp |
高
"pTwist PIC9K is a yeast expression vector, a Twist Bioscience rendition of pPIC9K(TM). It utilizes the methanol-inducible AOX1 promoter for controlled gene expression. The gene of interest is in-frame with the α-factor secretion signal, facilitating the excretion of the expressed protein. The kanamycin cassette in the vector can be used for kanamycin selection in E. coli and gentamycin selection in Pichia. PpHIS4 is present for Histidine auxotrophy selection. 插入位点:Default - In frame with α-factor secretion signal on the N-terminus and is flanked with SnaBI and NotI for excision of the gene of interest"
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0.3 – 5.0 kbp |
Ampicillin
高
"pTwist PIC9 is a yeast expression vector, a Twist Bioscience rendition of pPIC9(TM). It utilizes the methanol-inducible AOX1 promoter for controlled gene expression. The gene of interest is in-frame with the α-factor secretion signal, facilitating the excretion of the expressed protein. PpHIS4 is present for Histidine auxotrophy selection. 插入位点:Default - In frame with α-factor secretion signal on the N-terminus and is flanked with SnaBI and NotI for excision of the gene of interest"
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| Default | 0.3 – 5.0 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV rbIgk2 是一种表达载体,包含兔 Igk2 光恒定区域。当把克隆到 pTwist CMV rbIgG1 中的重链可变区共同转染到哺乳动物细胞中时,就会产生目标抗体。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| rbIgk2 | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV rbIgk1 是一种表达载体,包含兔 Igk1 光恒定区域。请注意,Igk1 轻链恒定区含有一个未配对的 Cys,通常与轻链可变区中未配对的 Cys 配对。确保插入的轻链可变区在适当区域包含未配对的 Cys。当把克隆到 pTwist CMV rbIgG1 中的重链可变区共同转染到哺乳动物细胞中时,就会产生目标抗体。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| rbIgk1 | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV rbIgG1 是一种表达载体,包含兔 IgG 重恒定区域。当把克隆到 pTwist CMV rbIgk1 或 pTwist CMV rbIgk2 中的轻链可变区共同转染到哺乳动物细胞中时,就会产生目标抗体。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| rbIgG1 | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV mIgL2 是一种表达载体,包含小鼠 Ig Lambda 2 恒定区域。当与克隆到 pTwist CMV mIgG2a 中的重链可变区共转染到哺乳动物细胞中时,便能生成目标抗体。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| mIgL2 | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV mIgL1 是一种表达载体,包含小鼠 Ig Lambda 1 恒定区域。当与克隆到 pTwist CMV mIgG2a 中的重链可变区共转染到哺乳动物细胞中时,便能生成目标抗体。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| mIgL1 | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV mIgk 是一种表达载体,包含小鼠 Ig kappa 恒定区域。当与克隆到 pTwist CMV mIgG2a 中的重链可变区共转染到哺乳动物细胞中时,便能生成目标抗体。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| mIgk | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV mIgG2a(截短型)是一种表达载体,包含小鼠截短型 IgG2a 序列。本载体可用于 VHH 表达或其他蛋白质表达,但不应与轻链表达载体共转染。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| VHH mIgG2a | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV mIgG2a 是一种表达载体,包含小鼠 IgG2a 重恒定区域(mIgG2a)。当与克隆到 pTwist CMV mIgK、mIgL2 或 mIgL2 中的轻链可变区共转染到哺乳动物细胞中时,便能生成目标抗体。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| mIgG2a | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV 双特异性 hIgG1(旋钮)是一种表达载体,包含具有旋钮突变的人类 IgG1 双特异性常量。当把克隆到 pTwist CMV 双特异性 hIgG1(孔)中的重链可变区和克隆到 pTwist hIgK 或 hIgL2 中的轻链可变区共同转染到哺乳动物细胞中时,就会产生目标抗体。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| bispecific hIgG1 full knob | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV 双特异性 hIgG1(孔)是一种表达载体,包含带有孔突变的人类 IgG1 双特异性全恒定区域。当把克隆到 pTwist CMV 双特异性 hIgG1(旋钮)中的重链可变区和克隆到 pTwist hIgK 或 hIgL2 中的轻链可变区共同转染到哺乳动物细胞中时,就会产生目标抗体。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| bispecific hIgG1 full hole | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV hIgG1_LS 是一种表达载体,包含 M428L/N434S (LS) 突变的人类 IgG1 同种型恒定区域。M428L/N434S 是人类 IgG1 抗体 Fc 区的半衰期延长突变。当与克隆到 pTwist hIgK 或 hIgL2 中的轻链可变区共转染到哺乳动物细胞中时便能生成目标抗体。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| hIgG1 L403S | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV hIgG1(LALA+PG+YTE)是一种表达载体,包含人类 IgG1 同种型恒定区域,并带有 L234A/L235A+P329G+M252Y/S254T/T256E 突变,有助于效应器功能沉寂。当与克隆到 pTwist hIgK 或 hIgL2 中的轻链可变区共转染到哺乳动物细胞中时便能生成目标抗体。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| hIgG1L234A_L235A+P329G+M252Y_S254T_T256E | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
pTwist CMV 双特异性 hIgG1(残孔)是一种表达载体,包含有带有孔突变的截短的人类 IgG1 双特异性恒定区域。当把克隆到 pTwist CMV 双特异性 hIgG1(旋钮)中的重链可变区和克隆到 pTwist hIgK 或 hIgL2 中的轻链可变区共同转染到哺乳动物细胞中时,目标抗体以单价结合形式生产,结合臂位于旋钮一侧。插入位点不包含 kozak 或信号肽序列,应在订购时注明。
插入点| 姓名 | 支持的序列长度 |
|---|---|
| bispecific hIgG1 stump hole | 0 - 7000 kbp |
Ampicillin
高
将您自己的载体发送给我们,我们会在几天内将序列完美的 DNA 导入到您的载体中。
*快速基因服务的交付时间最快 4-7 个工作日,对于 10 μg - 100 μg 和 100 μg - 1 mg DNA 制备规模,交付时间增至 8-10 个工作日。
在 Clariant,我们为 Twist Bioscience 的各种宿主生物体配备了各种内部载体。我们利用 Twist Bioscience 的基因合成和定制克隆,获得高成功率和快速周转时间。我们的目标是将大部分常规分子生物学工作进行外包,以集中我们的研究力量,并加快我们的开发时间。
质量非常好,我发现与其他公司的 DNA 片段相比,使用这些基因进行的克隆更容易一次就成功。
这就是我们非常喜欢在线订购门户的原因,我们能够明确知道 Twist 生产基因的进度。当我们输入序列后,Twist 的算法马上显示“百分百可以”。事实证明,Twist 合成这些困难的序列轻而易举。
所得结果特定于获得该结果的机构,可能无法反映在其他机构可实现的结果。
听听科学家们怎么说

在 Clariant,我们为 Twist Bioscience 的各种宿主生物体配备了各种内部载体。我们利用 Twist Bioscience 的基因合成和定制克隆,获得高成功率和快速周转时间。Our goal is to outsource most of our routine molecular biology work to focus our research force and speed up our development times..
HELGE JOCHENS 博士
Clariant

The quality has been excellent, and I find that cloning with these genes is successful more often on the first time than with DNA fragments from other companies..
AMANDA PORTILLO 博士
系统与合成生物学研究所

这就是我们非常喜欢在线订购门户的原因,我们能够明确知道 Twist 生产基因的进度。当我们输入序列后,Twist 的算法马上显示“百分百可以”。事实证明,Twist 合成这些困难的序列轻而易举。...
Philippe Marliere 博士
系统与合成生物学研究所
所得结果特定于获得该结果的机构,可能无法反映在其他机构可实现的结果。
We do not use restriction enzyme based cloning. 如果预计要在限制性酶切之后进行 DNA 连接,请勿在您的插入片段中加入任何额外的核苷酸。
When you place an order for a clonal gene, we synthesize exactly the insert sequence you send us. 如果您确实包含了侧翼限制性酶位点,我们也会对其进行合成;不会切除额外的碱基对。一旦收到插入片段序列,就不会以任何方式对其进行处理。
如果您使用 Twist 或定制载体下达克隆基因订单,我们强烈建议您使用设计器中的“下载序列”按钮来仔细检查最终构建体的序列:
Please note that once a gene order has been placed, we cannot alter the sequence in any way - if you discover an error in your construct, please contact customersupport@twistbioscience.com for assistance.
请提供给我们至少 100 ul 浓度为 100 ng/ul 的 10 ug 载体 DNA。载体 DNA 数量不足将造成存储过程的延迟。
不可以,您必须将载体的完整序列一起发送至 Twist。此信息将用于序列质控和确认克隆策略。我们将对您的载体进行测序,并将其与您发送给我们的序列进行比较。两个序列结果之间的错误或不匹配可能会推迟载体的存储。
您需要上传 GenBank 格式的完整载体序列以及将送至 Twist 的质粒的完整序列。Twist 将对收到的载体进行测序,以确保序列匹配。若出现任何差异,都会延缓存储过程。
确保您的载体满足以下要求:
抗生素耐药性:
质粒必须包含以下大肠杆菌抗生素耐药性标记之一标准浓度如下:
抗生素 | 生产中可用的标准浓度 (ug/mL) |
Kan | 50 |
AMP | 100 |
CHLOR | 25 |
APRA | 50 |
SPEC | 100 |
TET | 10 |
ZEO | 50 |
BLAST | 100 |
Cell Lines (E. coli)
拷贝数
仅允许使用结构复制起点。
Twist 定义 | 已接受 | 示例 |
高 | 是 | ColE1/pMB1/pBR322/pUC |
中 | 是,小规模制备收率下降 | p15A |
低 | 否 | pSC101 |
生长条件