利用高保真固相文库合成来避免生物催化剂定向进化中的偏好性

探索 Twist 组合基因突变文库的组成如何促使每个定向进化实验发现更多的突变。

生物催化剂广泛应用于有机合成和生物技术领域,而定向进化是创造新型生物催化剂的一种强大技术。该技术能够消除天然生物催化剂存在的底物适用范围窄、活性低、区域选择性或立体选择性差等缺陷。由于常规的基于 PCR 的诱变技术如易错 PCR (error prone PCR, epPCR)、饱和突变 (saturation mutagenesis, SM) 等存在缺陷,定向进化未能充分发挥其潜力。在此我们展示了如何利用高保真固相技术在硅芯片上进行化学基因合成,然后进行有效的基因组装,构建组合文库,来缓解这些问题。


本应用指南中涵盖
用于生成组合基因突变文库的 PCR 和固相合成之间的比较
各种情况下的文库组成细分
每种文库在柠檬烯环氧化物水解酶定向进化中的应用
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