来自单个寡核苷酸池的多聚焦 CRISPR 文库

使用 CRISPR/Cas9 系统进行功能性遗传筛选是大规模探索基因功能的一种强大工具,但该技术的可及性和实施受到现有预定义 CRISPR sgRNA 文库的限制。本文将单个 Twist 寡核苷酸池与定制文库多重克隆(CLUE;crispr-clue.de)——一种便于使用的生物信息学和网络实验室工作流——结合使用,以生成大量高质量的定制 sgRNA 文库。Twist 寡核苷酸池具有优异的保真度,可保留所得 CLUE 文库中 sgRNA 的统一表达,且不会产生跨文库污染,满足 CRISPR 筛选应用成功的严格要求。


本应用指南中涵盖
如何使用 CLUE 来设计多个聚焦指南文库。
解复用时 Twist 库质量如何确保获得成功
带有从一个更大的池中解复的 100 个指南的聚焦 CRISPR 筛选
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