用于酶工程、细胞治疗和基因编辑技术的新一代合成文库

Twist Bioscience 已扩展了一系列新一代文库产品,其中包括规律成簇间隔短回文重复序列 (CRISPR) 单向导 RNA (sgRNA) 和双向导 (dgRNA) 文库、同义密码子 (SynCodon) 文库以及配对 T 细胞受体 (TCR) 和嵌合抗原受体 T 细胞 (CAR-T) 文库。利用 Twist Bioscience 的硅基 DNA 合成平台,通过高质量的寡核苷酸池和基因片段单独合成和引入精确的突变。另外,结合我们在基因合成和 DNA 组装方面的分子生物学专业知识,Twist Bioscience 可以构建全长、高度多样性、精确的文库,最大程度地提高您的筛选能力。

CRISPR sgRNA 和 dgRNA 文库作为高通量基因编辑和敲除分子靶标的工具,其效率极佳。利用 CRISPR 基因编辑技术的特异性,研究人员可结合所设计的 gRNA 和慢病毒质粒,创建一个即用型转导文库产品。据最近的文献报道,dgRNA 文库越来越受欢迎。采用两种 gRNA 靶向单个或多个基因,可提高突变频率和突变特异性。采用高效的单链 DNA 分离技术,Twist 可生成两组 gRNA 之间匹配率大于 90% 的 dgRNA。

SynCodon 文库使研究人员能够探索酶工程的新兴领域。上述文库涉及蛋白质序列中每个氨基酸的同义密码子产生的突变。密码子优化有助于提高蛋白质的产量、结合亲和力、稳定性和蛋白质的表达。利用 SynCodon 文库,客户可确定给定蛋白质的最佳同义密码子使用频率。

组合组装时,TCR 和嵌合抗原受体 T 细胞 (CAR-T) 文库可帮助筛选两种文库类型内的大规模模块集。然而采用新的长读测序技术,客户对 TCR 文库的 α 和 β 配对以及 CAR-T 文库的抗体结合 (scFv、Fab、VHH、scFab)、铰链域、跨膜域和信号域配对更加有信心,因此能够针对每种模块类型进行特定的设计。Twist 利用已获专利的 DNA 组装技术,以高通量的方式有效组装独特的结构域组合,从而使下游筛选尽可能精确和高效。

合成文库根据计算机设计计算,并采用合成的 DNA 片段,引入多样性。利用 Twist 独特的硅基 DNA 合成平台,我们可生成用于合成文库生产的个体化模块化结构域。上述模块采用新型 DNA 组装技术构建,其多样性高达约 104 - 1010

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