Vorbereitung Ihrer Bestellung

Stellen Sie sicher, dass Ihr Vektor die folgenden Anforderungen erfüllt:

• Vektorvolumen ≥ 100 ul (Plasmidmaterial kann nicht auf Filterpapier eingereicht werden)
• Vektorkonzentration ≥ 100 ng/ul
• Vektormasse 10 ug
• muss bakteriellen Replikationsursprung haben (keine niedrige Kopie)
• muss klonale Zellpopulation sein
• muss zirkulär sein
• muss Antibiotikaresistenzmarker aufweisen
• darf keine Homopolymere/repetitive Sequenz von > 9 bp innerhalb von 40 bp von der Insertionsstelle enthalten
• Wiederholungen: muss mindestens 40 bp einer eindeutigen Sequenz ohne direkte oder invertierte Wiederholungen von > 19 bp, der Insertionsstelle vor- und nachgelagert, enthalten
• darf kein ccdB im endgültigen Genprodukt enthalten
• muss in der Lage sein, innerhalb von 50 bp von der Insertionsstelle nach Restriktionsenzymstelle zu linearisieren
• muss BSL-1-konform sein

Antibiotikaresistenz:

Plasmid muss einen der folgenden Antibiotikaresistenzmarker für E. coli enthalten. Standardkonzentrationen sind aufgeführt:

Zelllinien (E. coli)       

• in der Produktion verfügbare Zelllinie        
• Klonierungsstamm ähnlich DH10Beta   
• Stbl3-ähnlicher Stamm (kann bei 37 ℃ gezüchtet werden)        

Kopienummer              

Es sind nur konstitutive Replikationsursprünge zulässig.

Wachstumsbedingungen     

• Standardtemperatur: 37 ℃/30 ℃   
• Standardzeit: Über Nacht/24 Std.         
• Beschichtete Kolonien müssen nach 16 Stunden/24 Stunden Wachstum auf LB-Lennox eine automatisierungsfreundliche Größe erreichen.

Sie müssen die vollständige Vektorsequenz im GenBank-Format zusammen mit der vollständigen Sequenz des Plasmids, das an Twist geliefert wird, hochladen. Twist sequenziert den eingehenden Vektor, um sicherzustellen, dass die Sequenzen übereinstimmen. Unstimmigkeiten verzögern den Onboarding-Prozess.

Wir verwenden keine auf Restriktionsenzymen basierende Klonierung. Bitte fügen Sie keine zusätzlichen Nukleotide zu Ihren Insertionen hinzu in Erwartung einer Restriktionsenzym-Digestion und anschließenden DNA-Ligation.

Wenn Sie ein klonales Gen bestellen, wird die von Ihnen gesendete Insertionssequenz von uns genau synthetisiert. Wenn Sie flankierende Restriktionsenzymstellen einschließen, werden wir diese ebenfalls synthetisieren. Zusätzliche Basenpaare werden nicht herausgeschnitten. Die Insertionssequenzen werden in keiner Weise verarbeitet, nachdem sie bei uns eingegangen sind.  

Wenn Sie eine Bestellung für ein klonales Gen mit einem Twist Vektor oder einem benutzerdefinierten Vektor aufgeben, empfehlen wir dringend, die Sequenz des endgültigen Konstrukts mithilfe der Schaltfläche zum Herunterladen der Sequenzen im Designer zu überprüfen:

Bitte beachten Sie, dass wir nach der Bestellung eines Gens die Sequenz in keiner Weise ändern können. Wenn Sie einen Fehler in Ihrem Konstrukt entdecken, wenden Sie sich bitte an [email protected], um Unterstützung zu erhalten.

Bitte stellen Sie uns 10 ug Vektor-DNA in einer Konzentration von 100 ng/ul in mindestens 100 ul zur Verfügung. Eine unzureichende Menge an Vektor-DNA führt zu einer Verzögerung des Onboarding-Prozesses.

Nein, Sie müssen die vollständige Sequenz des an Twist gesendeten Vektors angeben. Wir verwenden diese Informationen zur Sequenz-Qualitätskontrolle und zur Bestätigung der Klonierungsstrategie. Wir werden Ihren Vektor sequenzieren und ihn mit der Sequenz vergleichen, die Sie uns gesendet haben. Fehler oder Inkongruenzen zwischen den beiden Sequenzergebnissen können das Vektor-Onboarding verzögern.

Stellen Sie sicher, dass Ihr Vektor die folgenden Anforderungen erfüllt:

• Vektorvolumen ≥ 100 ul (Plasmidmaterial kann nicht auf Filterpapier eingereicht werden)
• Vektorkonzentration ≥ 100 ng/ul
• Vektormasse 10 ug
• muss bakteriellen Replikationsursprung haben (keine niedrige Kopie)
• muss klonale Zellpopulation sein
• muss zirkulär sein
• muss Antibiotikaresistenzmarker aufweisen
• darf keine Homopolymere/repetitive Sequenz von > 9 bp innerhalb von 40 bp von der Insertionsstelle enthalten
• Wiederholungen: muss mindestens 40 bp einer eindeutigen Sequenz ohne direkte oder invertierte Wiederholungen von > 19 bp, der Insertionsstelle vor- und nachgelagert, enthalten
• darf kein ccdB im endgültigen Genprodukt enthalten
• muss in der Lage sein, innerhalb von 50 bp von der Insertionsstelle nach Restriktionsenzymstelle zu linearisieren
• muss BSL-1-konform sein

Antibiotikaresistenz:

Plasmid muss einen der folgenden Antibiotikaresistenzmarker für E. coli enthalten. Standardkonzentrationen sind aufgeführt:

Zelllinien (E. coli)       

• in der Produktion verfügbare Zelllinie        
• Klonierungsstamm ähnlich DH10Beta   
• Stbl3-ähnlicher Stamm (kann bei 37 ℃ gezüchtet werden)        

Kopienummer              

Es sind nur konstitutive Replikationsursprünge zulässig.

Wachstumsbedingungen     

• Standardtemperatur: 37 ℃/30 ℃   
• Standardzeit: Über Nacht/24 Std.         
• Beschichtete Kolonien müssen nach 16 Stunden/24 Stunden Wachstum auf LB-Lennox eine automatisierungsfreundliche Größe erreichen.

Sie müssen die vollständige Vektorsequenz im GenBank-Format zusammen mit der vollständigen Sequenz des Plasmids, das an Twist geliefert wird, hochladen. Twist sequenziert den eingehenden Vektor, um sicherzustellen, dass die Sequenzen übereinstimmen. Unstimmigkeiten verzögern den Onboarding-Prozess.

Wir verwenden keine auf Restriktionsenzymen basierende Klonierung. Bitte fügen Sie keine zusätzlichen Nukleotide zu Ihren Insertionen hinzu in Erwartung einer Restriktionsenzym-Digestion und anschließenden DNA-Ligation.

Wenn Sie ein klonales Gen bestellen, wird die von Ihnen gesendete Insertionssequenz von uns genau synthetisiert. Wenn Sie flankierende Restriktionsenzymstellen einschließen, werden wir diese ebenfalls synthetisieren. Zusätzliche Basenpaare werden nicht herausgeschnitten. Die Insertionssequenzen werden in keiner Weise verarbeitet, nachdem sie bei uns eingegangen sind.  

Wenn Sie eine Bestellung für ein klonales Gen mit einem Twist Vektor oder einem benutzerdefinierten Vektor aufgeben, empfehlen wir dringend, die Sequenz des endgültigen Konstrukts mithilfe der Schaltfläche zum Herunterladen der Sequenzen im Designer zu überprüfen:

Bitte beachten Sie, dass wir nach der Bestellung eines Gens die Sequenz in keiner Weise ändern können. Wenn Sie einen Fehler in Ihrem Konstrukt entdecken, wenden Sie sich bitte an [email protected], um Unterstützung zu erhalten.

Bitte stellen Sie uns 10 ug Vektor-DNA in einer Konzentration von 100 ng/ul in mindestens 100 ul zur Verfügung. Eine unzureichende Menge an Vektor-DNA führt zu einer Verzögerung des Onboarding-Prozesses.

Nein, Sie müssen die vollständige Sequenz des an Twist gesendeten Vektors angeben. Wir verwenden diese Informationen zur Sequenz-Qualitätskontrolle und zur Bestätigung der Klonierungsstrategie. Wir werden Ihren Vektor sequenzieren und ihn mit der Sequenz vergleichen, die Sie uns gesendet haben. Fehler oder Inkongruenzen zwischen den beiden Sequenzergebnissen können das Vektor-Onboarding verzögern.