Übersicht

Leistungsfähige Technologie für zuverlässige, skalierbare cfDNA-Workflows 

Generieren Sie hochwertige Bibliotheken aus anspruchsvollen cfDNA-Eingaben mit einem optimierten Workflow, der eine hohe Konversionsrate und Empfindlichkeit für die Detektion seltener Varianten bietet. Das für einen geringen Input und fragmentierte Proben entwickelte Twist cfDNALibrary Preparation Kit hilft Ihnen, kritische Erkenntnisse mit Zuversicht und Effizienz zu gewinnen.

Maximierte Erkennung seltener Varianten

Hohe Konvertierungsrate erkennt zuverlässig seltene Varianten (≤ 0,1 % VAF). Librarys mit hoher Abdeckung, kompatibel mit Duplex-Sequenzierungs-Workflows, die vom Twist UMI-Adaptersystem unterstützt werden.

Optimierter Arbeitsablauf für wertvolle Proben

Robuste Leistung, auch bei geringem Probeninput (<1 ng). Sequenzfertige Bibliotheken in 2 Stunden.

Amplifikation ohne Verzerrungen

Bietet eine gleichmäßige Abdeckung bei 5–95 % GC-Gehalt und bewahrt die Sichtbarkeit von herausfordernden genomischen Regionen und schwer zu erfassenden Zielen. Konsistent hohe Ausbeuten aus komplexen Librarys – selbst bei DNA-Eingaben ≤100 pg. Zuverlässige Identifizierung von Varianten dank verbesserter Genauigkeit und reduziertem Replikationsschlupf

Leistungsfähige Technologie für zuverlässige, skalierbare cfDNA-Workflows 

Generieren Sie hochwertige Bibliotheken aus anspruchsvollen cfDNA-Eingaben mit einem optimierten Workflow, der eine hohe Konversionsrate und Empfindlichkeit für die Detektion seltener Varianten bietet. Das für einen geringen Input und fragmentierte Proben entwickelte Twist cfDNALibrary Preparation Kit hilft Ihnen, kritische Erkenntnisse mit Zuversicht und Effizienz zu gewinnen.

Maximierte Erkennung seltener Varianten

Hohe Konvertierungsrate erkennt zuverlässig seltene Varianten (≤ 0,1 % VAF). Librarys mit hoher Abdeckung, kompatibel mit Duplex-Sequenzierungs-Workflows, die vom Twist UMI-Adaptersystem unterstützt werden.

Optimierter Arbeitsablauf für wertvolle Proben

Robuste Leistung, auch bei geringem Probeninput (<1 ng). Sequenzfertige Bibliotheken in 2 Stunden.

Amplifikation ohne Verzerrungen

Bietet eine gleichmäßige Abdeckung bei 5–95 % GC-Gehalt und bewahrt die Sichtbarkeit von herausfordernden genomischen Regionen und schwer zu erfassenden Zielen. Konsistent hohe Ausbeuten aus komplexen Librarys – selbst bei DNA-Eingaben ≤100 pg. Zuverlässige Identifizierung von Varianten dank verbesserter Genauigkeit und reduziertem Replikationsschlupf

Produkt

Produktdaten

Hochpräzise Amplifikation mit PCR
Hochpräzise Amplifikation mit PCR

 

Abbildung 1. Vergleichbarer Basensubstitutions-Fehlerraten mit und ohne TrueAmp-Amplifikation. Das Twist cfDNA Library Preparation Kit wurde verwendet, um Bibliotheken mit Twist cfDNA Pan-Cancer Referenzstandard V2 als Eingabematerial zu generieren. Um PCR-freie Bedingungen zu erzeugen, wurden während der Ligation Twist Full Length Unique Dual Index (UDI) Adapter verwendet. Die Bedingungen mit PCR wurden durch Verwendung von PCR Twist Universal Adaptern während der Ligation hergestellt. Der PCR-Aufbau wurde mit Twist TrueAmp Polymerase Mix und UDI-Primern über 6 Zyklen amplifiziert. Die Librarys wurden gepoolt, sequenziert und analysiert. Zwischen der PCR-freien und der TrueAmp-Library wurden vergleichbare Fehlerraten beobachtet.

Höhere Konvertierungsrate = Höhere Ausbeute
Hohe Konversionsrate

 

Abbildung 2. Twist cfDNA Library Preparation Kit liefert höhere cfDNA-Library-Ausbeuten. Nach der Generierung der Library wurden die Proben in 20 μl Wasser eluiert und 1 μl wurde mit dem Qubit™ dsDNA Broad Range Kit quantifiziert.

Höhere Empfindlichkeit und höhere Genauigkeit
Höhere Empfindlichkeit und höhere Genauigkeit

 

Abbildung 3. Das Twist cfDNA Library Preparation und Hyb Mix Kit ermöglicht den empfindlichen und genauen Nachweis von Varianten bis zu 0,25 % VAF. Die Librarys wurden im Single-Plex-Verfahren mit einem benutzerdefinierten 50-kb-Onkologie-Panel erfasst, das auf 217 SNP-Variantenstellen im Pan-Cancer-Standardmaterial abzielte. Verpasste Varianten werden berechnet, indem Stellen mit weniger als 1 Variantenfamilie durch die Gesamtzahl der nachweisbaren Variantenstellen dividiert werden.

Verbessertes Duplexing = Höhere Komplexität
Verbessertes Duplexing = Höhere Komplexität

 

Abbildung 4. Twist cfDNA Library Preparation und Hyb Mix Kit bietet eine höhere Komplexität mit und ohne UMI-Deduplizierung.

Geringer Input, nachgewiesen mit nativer cfDNA
Geringer Input, nachgewiesen mit nativer cfDNA

 

Abbildung 5. Twist cfDNA Library Preparation Kit liefert höhere cfDNA-Library-Ausbeuten mit nativen cfDNA-Proben. Nach der Generierung der Library wurden die Proben in 20 μl Wasser eluiert und 1 μl wurde mit dem Qubit™ dsDNA Broad Range Kit quantifiziert.

cfDNA Library Preparation Kit Workflow

cfDNA Library Prep Kit mit dem TrueAmp Polymerase Mix Workflow

Der cfDNA-Workflow basiert auf optimierter Technologie für GC-Ausgleich und hochpräzise Amplifikation. Dieses Design liefert eine hohe Amplifikationsausbeute und minimiert gleichzeitig durch PCR eingeführte Fehler, die die Erkennung von Varianten mit niedriger Frequenz beeinträchtigen können.

Das Ergebnis sind einheitliche, hochwertige Librarys am Ende eines schnellen, 2-stündigen Workflows. Die Aptamer-basierte Hot-Start-Steuerung gewährleistet Stabilität bei Raumtemperatur für die automatisierte Einrichtung, und der 2×-Mastermix in einem einzigen Röhrchen vereinfacht sowohl WGS- als auch Target Enrichment-Workflows.

Produktdaten

Hochpräzise Amplifikation mit PCR
Hochpräzise Amplifikation mit PCR

 

Abbildung 1. Vergleichbarer Basensubstitutions-Fehlerraten mit und ohne TrueAmp-Amplifikation. Das Twist cfDNA Library Preparation Kit wurde verwendet, um Bibliotheken mit Twist cfDNA Pan-Cancer Referenzstandard V2 als Eingabematerial zu generieren. Um PCR-freie Bedingungen zu erzeugen, wurden während der Ligation Twist Full Length Unique Dual Index (UDI) Adapter verwendet. Die Bedingungen mit PCR wurden durch Verwendung von PCR Twist Universal Adaptern während der Ligation hergestellt. Der PCR-Aufbau wurde mit Twist TrueAmp Polymerase Mix und UDI-Primern über 6 Zyklen amplifiziert. Die Librarys wurden gepoolt, sequenziert und analysiert. Zwischen der PCR-freien und der TrueAmp-Library wurden vergleichbare Fehlerraten beobachtet.

Höhere Konvertierungsrate = Höhere Ausbeute
Hohe Konversionsrate

 

Abbildung 2. Twist cfDNA Library Preparation Kit liefert höhere cfDNA-Library-Ausbeuten. Nach der Generierung der Library wurden die Proben in 20 μl Wasser eluiert und 1 μl wurde mit dem Qubit™ dsDNA Broad Range Kit quantifiziert.

Höhere Empfindlichkeit und höhere Genauigkeit
Höhere Empfindlichkeit und höhere Genauigkeit

 

Abbildung 3. Das Twist cfDNA Library Preparation und Hyb Mix Kit ermöglicht den empfindlichen und genauen Nachweis von Varianten bis zu 0,25 % VAF. Die Librarys wurden im Single-Plex-Verfahren mit einem benutzerdefinierten 50-kb-Onkologie-Panel erfasst, das auf 217 SNP-Variantenstellen im Pan-Cancer-Standardmaterial abzielte. Verpasste Varianten werden berechnet, indem Stellen mit weniger als 1 Variantenfamilie durch die Gesamtzahl der nachweisbaren Variantenstellen dividiert werden.

Verbessertes Duplexing = Höhere Komplexität
Verbessertes Duplexing = Höhere Komplexität

 

Abbildung 4. Twist cfDNA Library Preparation und Hyb Mix Kit bietet eine höhere Komplexität mit und ohne UMI-Deduplizierung.

Geringer Input, nachgewiesen mit nativer cfDNA
Geringer Input, nachgewiesen mit nativer cfDNA

 

Abbildung 5. Twist cfDNA Library Preparation Kit liefert höhere cfDNA-Library-Ausbeuten mit nativen cfDNA-Proben. Nach der Generierung der Library wurden die Proben in 20 μl Wasser eluiert und 1 μl wurde mit dem Qubit™ dsDNA Broad Range Kit quantifiziert.

cfDNA Library Preparation Kit Workflow

cfDNA Library Prep Kit mit dem TrueAmp Polymerase Mix Workflow

Der cfDNA-Workflow basiert auf optimierter Technologie für GC-Ausgleich und hochpräzise Amplifikation. Dieses Design liefert eine hohe Amplifikationsausbeute und minimiert gleichzeitig durch PCR eingeführte Fehler, die die Erkennung von Varianten mit niedriger Frequenz beeinträchtigen können.

Das Ergebnis sind einheitliche, hochwertige Librarys am Ende eines schnellen, 2-stündigen Workflows. Die Aptamer-basierte Hot-Start-Steuerung gewährleistet Stabilität bei Raumtemperatur für die automatisierte Einrichtung, und der 2×-Mastermix in einem einzigen Röhrchen vereinfacht sowohl WGS- als auch Target Enrichment-Workflows.

Ressourcen
Anwendung

Verwandte Workflows und Anwendungen

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