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Variant Library-Präzisionstechnologie ermöglicht zielgerichtete Analysen

Die massiv parallele siliziumbasierte DNA-Syntheseplattform von Twist erzeugt äußerst einheitliche und genaue Oligonukleotide, wobei 90 % der Oligonukleotide innerhalb des <2,5-Fachen des Mittelwerts liegen, zusammen mit einer branchenführenden niedrigen Fehlerrate von 1:2.000 nt.

In Kombination mit unserer umfassenden Erfahrung in der Molekularbiologie ermöglicht die Oligonukleotid-Syntheseplattform von Twist die Herstellung sehr unterschiedlicher Genmutanten-Libraries mit ausgezeichneter Variantenrepräsentation und hochspezifischer benutzerdefinierter Zusammensetzung, und zwar ohne unerwünschte Verzerrungen oder Motive. Die Twist-Library-Technologie ermöglicht eine umfassende Interrogation des Varianten-Sequenzabschnitts.

Hochdiversitätspräzision
Hochdiversitätspräzision
Einfache Integration verschiedener Variantendomänen in eines oder mehrere Scaffolds
Präzise Kontrolle der Codonverwendung (alle 64 Codone), Verteilung der Aminosäuren und Längenvariation
Verifizierte Qualität
Verifizierte Qualität
Rigorose Qualitätskontrolle, einschließlich NGS-Verifizierung von modifizierten Bereichen
Variantenverhältnis der Sequenzen dokumentiert
Gleichmäßige Verteilung der benutzerdefinierten Varianten
Keine vorzeitigen Stoppcodons oder unerwünschten Codons
Flexibilität
Flexibilität
Design aller Sequenzen, einzelne oder multiple Domänen und Kombinationen – einzelne, paarweise oder dreifache Varianten
Modulares Synthesesystem befähigt die Iteration von zukünftigen Libraries
Höhere Flexibilität als TRIM und der Degenerationsansatz
Variant Library-Präzisionstechnologie ermöglicht zielgerichtete Analysen

Erfahren Sie mehr über die Fähigkeit von Twist, komplexe Libraries mit hoher Diversität in begrenzten Regionen (z. B. CDRs) zu konstruieren, und stellen technologische Fortschritte vor, die den Aufbau synthetischer DNA-Libraries mit über die Länge der Konstrukte verstreuter Diversität ermöglichen.

Webinar ansehen

Wussten Sie, dass die Ionenladung die Antikörper-Target-Bindung beeinflussen kann?

Erfahren Sie, wie Twist einem führenden Pharmaunternehmen dabei geholfen hat, Schlüsselrückstände, die sowohl an der Target-Erkennung als auch an der Antikörperladung beteiligt sind, durch die Synthese kombinatorischer Varianten-Libraries genau zu interrogieren.

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Variant Library-Präzisionstechnologie ermöglicht zielgerichtete Analysen

Die massiv parallele siliziumbasierte DNA-Syntheseplattform von Twist erzeugt äußerst einheitliche und genaue Oligonukleotide, wobei 90 % der Oligonukleotide innerhalb des <2,5-Fachen des Mittelwerts liegen, zusammen mit einer branchenführenden niedrigen Fehlerrate von 1:2.000 nt.

In Kombination mit unserer umfassenden Erfahrung in der Molekularbiologie ermöglicht die Oligonukleotid-Syntheseplattform von Twist die Herstellung sehr unterschiedlicher Genmutanten-Libraries mit ausgezeichneter Variantenrepräsentation und hochspezifischer benutzerdefinierter Zusammensetzung, und zwar ohne unerwünschte Verzerrungen oder Motive. Die Twist-Library-Technologie ermöglicht eine umfassende Interrogation des Varianten-Sequenzabschnitts.

Hochdiversitätspräzision
Hochdiversitätspräzision
Einfache Integration verschiedener Variantendomänen in eines oder mehrere Scaffolds
Präzise Kontrolle der Codonverwendung (alle 64 Codone), Verteilung der Aminosäuren und Längenvariation
Verifizierte Qualität
Verifizierte Qualität
Rigorose Qualitätskontrolle, einschließlich NGS-Verifizierung von modifizierten Bereichen
Variantenverhältnis der Sequenzen dokumentiert
Gleichmäßige Verteilung der benutzerdefinierten Varianten
Keine vorzeitigen Stoppcodons oder unerwünschten Codons
Flexibilität
Flexibilität
Design aller Sequenzen, einzelne oder multiple Domänen und Kombinationen – einzelne, paarweise oder dreifache Varianten
Modulares Synthesesystem befähigt die Iteration von zukünftigen Libraries
Höhere Flexibilität als TRIM und der Degenerationsansatz
Variant Library-Präzisionstechnologie ermöglicht zielgerichtete Analysen

Erfahren Sie mehr über die Fähigkeit von Twist, komplexe Libraries mit hoher Diversität in begrenzten Regionen (z. B. CDRs) zu konstruieren, und stellen technologische Fortschritte vor, die den Aufbau synthetischer DNA-Libraries mit über die Länge der Konstrukte verstreuter Diversität ermöglichen.

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Wussten Sie, dass die Ionenladung die Antikörper-Target-Bindung beeinflussen kann?

Erfahren Sie, wie Twist einem führenden Pharmaunternehmen dabei geholfen hat, Schlüsselrückstände, die sowohl an der Target-Erkennung als auch an der Antikörperladung beteiligt sind, durch die Synthese kombinatorischer Varianten-Libraries genau zu interrogieren.

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DATEN
Hochwertige Daten

Die siliziumbasierte DNA-Syntheseplattform und Library-Technologie von Twist Bioscience bietet Wissenschaftlern qualitativ hochwertige Libraries, die in kürzerer Zeit zuverlässige Daten liefern. Im Vergleich zu zwei anderen konkurrierenden Technologien (Abbildung 1) zeigte die Twist-Library weniger als 1 % Abweichung von der vorgesehenen Aminosäurefrequenz.  Zusätzlich zum präzisen Abgleich der vorgesehenen Aminosäureverhältnisse integriert die In-silico-DNA-Syntheseplattform von Twist nahtlos erwünschte Bindungsmotive und Längenvariationen in Multi-Domain-Libraries, was Wissenschaftlern die Möglichkeit gibt, in präziser Weise Variant Libraries zu entwerfen und anzupassen, die eine umfassende Analyse des Variantenraums ermöglichen.

Außerdem werden mit Twist-Libraries die für NNK- und TRIM-Libraries typischen Probleme und Schwierigkeiten vermieden. Jede Variante wird Base für Base gedruckt und vor der Synthese überprüft, um Stoppcodons, Haftungsmotive, unerwünschte Mutationen und unerwünschte Verzerrungen bereits zu Beginn des Prozesses zu eliminieren. Dadurch wird die Library mit den gewünschten funktionalen Varianten angereichert und der Aufwand für das Screening verringert.

Unsere branchenführenden, sofort einsatzbereiten, hochdiversen und präzise konzipierten Libraries bieten Wissenschaftlern mehr Möglichkeiten, ihre Forschungsziele zu erreichen.

Vergleich der Twist-Technologie NNK im Vergleich zu Trimer im Vergleich zu Twist
Überlegene Libraries

Twist nutzt die eigene Erfahrung mit Molekularbiologie zur präzisen Konstruktion der Variant Libraries. Unser Ansatz der Einzelbasis-Kontrolle ermöglicht es uns, hochdiverse Libraries ohne Motive zu liefern, die Ihre Screening-Prozesse verwirren könnten. Wir liefern vollständig angepasste Libraries von einmaliger Qualität, in denen die gewünschten Varianten zu von den Nutzern definierten Verhältnissen vorhanden sind. Hier sehen Sie ein CVL-Beispiel, welches diese Qualität repräsentiert. Es wurden Varianten in sieben aufeinanderfolgenden Aminosäurepositionen erzeugt, und alle haben die erwarteten Varianten an den gezeigten Positionen, wobei fast alle das gewünschte Verhältnis aufweisen:

An den Positionen 1 und 6 sollte die Wildtyp-Aminosäure bei 40 % (Position 1) und 30 % (Position 7) liegen. Für die übrigen 18 Aminosäuren wurde ein Anteil von 3,3 % gefordert.

An den Positionen 3 bis 5 sollten die Aminosäurenreste bei 5,3 % liegen, was dann auch beobachtet wurde.

Variant Library CVL-Verteilung
Benutzerdefinierte CDR-Libraries

Unsere Precise Variant Libraries ermöglichen es Ihnen zu wählen, welche einzigartigen CDR (Complimentary Defining Regions - komplementäre definierende Regionen)-Sequenzen in die Wahl Ihres Frameworks integriert werden sollen.

Bei jeder CDR kann eine Codonoptimierung angewendet werden, um die Schaffung von ungewünschten Restriktionsstellen zu vermeiden. Das maschinelle Lernen ist zu einem festen Bestandteil der wissenschaftlichen Forschung geworden und wurde als Instrument zur Analyse von Antikörper-Libraries und zur Identifizierung einzigartiger CDR-Kombinationen eingesetzt, die beispielsweise eine höhere Affinität und Spezifität ergeben würden. 

Zusammen mit der silikonbasierten Syntheseplattform von Twist können aus der Analyse generierte explizite Library-Kombinationen synthetisiert und nahtlos in eine komplett synthetische Library eingefügt werden, um die Erforschung des Variantenraums weiterzuentwickeln.

Benutzerdefinierte CDR-Libraries

 

Klonoption für Librarys

 

Unsere Plattform ermöglicht die einheitliche Synthese von hochkomplexen Oligonukleotiden, wodurch mögliche Verzerrungen im nachgeschalteten Arbeitsablauf minimiert werden. Unser Wissenschaftlerteam hat eine Strategie entwickelt, um diese Einheitlichkeit während der gesamten Library-Herstellung und des Klonens aufrechtzuerhalten. Dies sind Schritte im Arbeitsablauf, die nachweislich zu Verzerrungen führen, die dazu führen können, dass einige Varianten in den Screens/Assays unverhältnismäßig häufig auftauchen. Durch die Beibehaltung der Einheitlichkeit der Ausgangssubstanz und die Minimierung von Ausfällen und unterrepräsentierten Varianten sind unsere geklonten Librarys in der Lage, ein hohes Maß an Diversität aufrechtzuerhalten, was dazu beiträgt, Zeit und Aufwand für das Screening zu reduzieren. 

 

Beobachtete Amino

Die Abbildung zeigt die beobachtete Aminosäureverteilung an jeder Variantenposition nach der Herstellung (linear) und nach dem Klonen im Vergleich zur gewünschten Häufigkeit (erwartet).

 

Qualitätskontrolle der Libraries mit NGS

Da alle Librarys mit NGS verifiziert werden, können negative Daten verwendet werden, um Mutationen zu identifizieren, die keine verbesserten Funktionen ergeben, und diese können in der nächsten Iteration des Library-Designs entfernt werden.

Die Tabelle zeigt die Aminosäurehäufigkeit (%) an vier Stellen einer mutagenen Domäne nach dem linearen Aufbau der Library und nach dem Klonen. Die erwarteten Spalten für jede Position zeigen die gewünschte Häufigkeit jeder Aminosäuresubstitution. Diese Daten zeigen, dass alle erwarteten Varianten an allen Positionen vorhanden waren und die Einheitlichkeit während der gesamten Assemblierung und Klonierung beibehalten wurde.

 

ORF
Hochwertige Daten

Die siliziumbasierte DNA-Syntheseplattform und Library-Technologie von Twist Bioscience bietet Wissenschaftlern qualitativ hochwertige Libraries, die in kürzerer Zeit zuverlässige Daten liefern. Im Vergleich zu zwei anderen konkurrierenden Technologien (Abbildung 1) zeigte die Twist-Library weniger als 1 % Abweichung von der vorgesehenen Aminosäurefrequenz.  Zusätzlich zum präzisen Abgleich der vorgesehenen Aminosäureverhältnisse integriert die In-silico-DNA-Syntheseplattform von Twist nahtlos erwünschte Bindungsmotive und Längenvariationen in Multi-Domain-Libraries, was Wissenschaftlern die Möglichkeit gibt, in präziser Weise Variant Libraries zu entwerfen und anzupassen, die eine umfassende Analyse des Variantenraums ermöglichen.

Außerdem werden mit Twist-Libraries die für NNK- und TRIM-Libraries typischen Probleme und Schwierigkeiten vermieden. Jede Variante wird Base für Base gedruckt und vor der Synthese überprüft, um Stoppcodons, Haftungsmotive, unerwünschte Mutationen und unerwünschte Verzerrungen bereits zu Beginn des Prozesses zu eliminieren. Dadurch wird die Library mit den gewünschten funktionalen Varianten angereichert und der Aufwand für das Screening verringert.

Unsere branchenführenden, sofort einsatzbereiten, hochdiversen und präzise konzipierten Libraries bieten Wissenschaftlern mehr Möglichkeiten, ihre Forschungsziele zu erreichen.

Vergleich der Twist-Technologie NNK im Vergleich zu Trimer im Vergleich zu Twist
Überlegene Libraries

Twist nutzt die eigene Erfahrung mit Molekularbiologie zur präzisen Konstruktion der Variant Libraries. Unser Ansatz der Einzelbasis-Kontrolle ermöglicht es uns, hochdiverse Libraries ohne Motive zu liefern, die Ihre Screening-Prozesse verwirren könnten. Wir liefern vollständig angepasste Libraries von einmaliger Qualität, in denen die gewünschten Varianten zu von den Nutzern definierten Verhältnissen vorhanden sind. Hier sehen Sie ein CVL-Beispiel, welches diese Qualität repräsentiert. Es wurden Varianten in sieben aufeinanderfolgenden Aminosäurepositionen erzeugt, und alle haben die erwarteten Varianten an den gezeigten Positionen, wobei fast alle das gewünschte Verhältnis aufweisen:

An den Positionen 1 und 6 sollte die Wildtyp-Aminosäure bei 40 % (Position 1) und 30 % (Position 7) liegen. Für die übrigen 18 Aminosäuren wurde ein Anteil von 3,3 % gefordert.

An den Positionen 3 bis 5 sollten die Aminosäurenreste bei 5,3 % liegen, was dann auch beobachtet wurde.

Variant Library CVL-Verteilung
Benutzerdefinierte CDR-Libraries

Unsere Precise Variant Libraries ermöglichen es Ihnen zu wählen, welche einzigartigen CDR (Complimentary Defining Regions - komplementäre definierende Regionen)-Sequenzen in die Wahl Ihres Frameworks integriert werden sollen.

Bei jeder CDR kann eine Codonoptimierung angewendet werden, um die Schaffung von ungewünschten Restriktionsstellen zu vermeiden. Das maschinelle Lernen ist zu einem festen Bestandteil der wissenschaftlichen Forschung geworden und wurde als Instrument zur Analyse von Antikörper-Libraries und zur Identifizierung einzigartiger CDR-Kombinationen eingesetzt, die beispielsweise eine höhere Affinität und Spezifität ergeben würden. 

Zusammen mit der silikonbasierten Syntheseplattform von Twist können aus der Analyse generierte explizite Library-Kombinationen synthetisiert und nahtlos in eine komplett synthetische Library eingefügt werden, um die Erforschung des Variantenraums weiterzuentwickeln.

Benutzerdefinierte CDR-Libraries

 

Klonoption für Librarys

 

Unsere Plattform ermöglicht die einheitliche Synthese von hochkomplexen Oligonukleotiden, wodurch mögliche Verzerrungen im nachgeschalteten Arbeitsablauf minimiert werden. Unser Wissenschaftlerteam hat eine Strategie entwickelt, um diese Einheitlichkeit während der gesamten Library-Herstellung und des Klonens aufrechtzuerhalten. Dies sind Schritte im Arbeitsablauf, die nachweislich zu Verzerrungen führen, die dazu führen können, dass einige Varianten in den Screens/Assays unverhältnismäßig häufig auftauchen. Durch die Beibehaltung der Einheitlichkeit der Ausgangssubstanz und die Minimierung von Ausfällen und unterrepräsentierten Varianten sind unsere geklonten Librarys in der Lage, ein hohes Maß an Diversität aufrechtzuerhalten, was dazu beiträgt, Zeit und Aufwand für das Screening zu reduzieren. 

 

Beobachtete Amino

Die Abbildung zeigt die beobachtete Aminosäureverteilung an jeder Variantenposition nach der Herstellung (linear) und nach dem Klonen im Vergleich zur gewünschten Häufigkeit (erwartet).

 

Qualitätskontrolle der Libraries mit NGS

Da alle Librarys mit NGS verifiziert werden, können negative Daten verwendet werden, um Mutationen zu identifizieren, die keine verbesserten Funktionen ergeben, und diese können in der nächsten Iteration des Library-Designs entfernt werden.

Die Tabelle zeigt die Aminosäurehäufigkeit (%) an vier Stellen einer mutagenen Domäne nach dem linearen Aufbau der Library und nach dem Klonen. Die erwarteten Spalten für jede Position zeigen die gewünschte Häufigkeit jeder Aminosäuresubstitution. Diese Daten zeigen, dass alle erwarteten Varianten an allen Positionen vorhanden waren und die Einheitlichkeit während der gesamten Assemblierung und Klonierung beibehalten wurde.

 

ORF
Bestellung
Registerkartenkomponente links

Legen wir los

  • Schritt 1: Füllen Sie das Kontaktformular auf dieser Seite aus.
  • Schritt 2: Laden Sie das CVL-Einreichungsformular herunter und füllen Sie alle Felder im Formular für Ihr Library-Design aus.
  • Schritt 3: Laden Sie das ausgefüllte Einreichungsformular auf der Registerkarte „Datei senden“ auf dieser Seite hoch.
Registerkartenkomponente rechts
Registerkartenkomponente links

Bereit zum Senden?

  • Schritt 1: Laden Sie das ausgefüllte Einreichungsformular hoch.
  • Schritt 2: Die Experten unseres Library-Teams werden Ihr Projekt prüfen.
  • Schritt 3: Das Library-Team wird das Projekt prüfen und sich mit einem Angebot an Sie wenden.
  • Schritt 4: Sobald der Kunde das Angebot akzeptiert hat, sendet das Library-Team das Projekt an das Produktionsteam.

Bei Fragen senden Sie uns bitte eine E-Mail an [email protected].

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Bei Fragen senden Sie uns bitte eine E-Mail an [email protected].

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RESSOURCEN
Eliminierung der Verzerrung und unerwünschter Motive
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