Preparación del pedido

Asegúrese de que su vector cumpla con los requisitos siguientes:

• Volumen vectorial ≥ 100 ul (el material plasmídico no se puede enviar en papel de filtro)
• Concentración de vector ≥ 100 ng/ul
• Masa del vector 10 ug
• Debe tener un origen de replicación bacteriano (no en un número de copias bajo)
• Debe ser población clonal
• Debe ser circular
• Debe tener un marcador de resistencia a antibióticos
• No debe contener homopolímeros/secuencia repetitiva > 9 pb dentro de los 40 pb del sitio de inserción
• Repeticiones: debe contener al menos 40 pb de secuencia única sin repeticiones directas o invertidas > 19 pb antes y después del sitio de inserción
• No debe contener ccdB en el producto genético final
• Debe poder linealizar por el sitio de la enzima de restricción dentro de los 50 pb del sitio de inserción
• Debe ser compatible con BSL-1

Resistencia a antibióticos:

El plásmido debe contener uno de los siguientes marcadores de resistencia a antibióticos para la E. coli. Las concentraciones estándar están a continuación:

Líneas celulares (E. coli)       

• Línea celular disponible en producción        
• Cepa de clonación similar a DH10Beta   
• Cepa similar a Stbl3 (se puede cultivar a 37 ℃)        

Número de copias              

Solo se permiten los orígenes de replicación constitutivos.

Condiciones de crecimiento     

• Temperatura estándar: 37 ℃/30 ℃   
• Tiempo estándar: Noche/24 horas         
• Las colonias en placa deben alcanzar un tamaño compatible con la automatización después de 16 horas/24 horas de crecimiento en LB-Lennox.

Deberá cargar la secuencia completa del vector en formato GenBank con la secuencia completa del plásmido que se enviará a Twist. Twist secuenciará el vector entrante para garantizar que las secuencias coincidan. Cualquier discrepancia retrasará el proceso de incorporación.

No utilizamos la clonación basada en enzimas de restricción. No incluya nucleótidos adicionales en sus inserciones antes de la digestión de la enzima de restricción seguida de la ligadura del ADN.

Cuando realiza un pedido de un gen clonado, sintetizamos exactamente la secuencia de inserción que nos envía. Si incluye sitios de enzimas de restricción flanqueantes, también los sintetizaremos; los pares de bases adicionales no se eliminan. Las secuencias de inserción no se procesan de ninguna manera una vez que se reciben.  

Si está realizando un pedido de genes clonados utilizando un vector Twist o personalizado, le recomendamos encarecidamente que verifique la secuencia de la construcción final utilizando el botón para descargar secuencias en el diseñador:

Tenga en cuenta que, una vez que se ha realizado un pedido de genes, no podemos alterar la secuencia de ninguna manera; si descubre un error en su estructura, contacte con [email protected] para obtener ayuda.

Proporcione 10 ug de ADN del vector a una concentración de 100 ng/ul en al menos 100 ul. Una cantidad insuficiente de ADN del vector provocará un retraso en el proceso de incorporación.

No, debe incluir la secuencia completa del vector enviado a Twist. Usamos esta información para el control de calidad de la secuencia y para confirmar la estrategia de clonación. Secuenciaremos su vector y lo compararemos con la secuencia que nos envió. Los errores o discrepancias entre los dos resultados de la secuencia pueden retrasar la incorporación de vectores.

Asegúrese de que su vector cumpla con los requisitos siguientes:

• Volumen vectorial ≥ 100 ul (el material plasmídico no se puede enviar en papel de filtro)
• Concentración de vector ≥ 100 ng/ul
• Masa del vector 10 ug
• Debe tener un origen de replicación bacteriano (no en un número de copias bajo)
• Debe ser población clonal
• Debe ser circular
• Debe tener un marcador de resistencia a antibióticos
• No debe contener homopolímeros/secuencia repetitiva > 9 pb dentro de los 40 pb del sitio de inserción
• Repeticiones: debe contener al menos 40 pb de secuencia única sin repeticiones directas o invertidas > 19 pb antes y después del sitio de inserción
• No debe contener ccdB en el producto genético final
• Debe poder linealizar por el sitio de la enzima de restricción dentro de los 50 pb del sitio de inserción
• Debe ser compatible con BSL-1

Resistencia a antibióticos:

El plásmido debe contener uno de los siguientes marcadores de resistencia a antibióticos para la E. coli. Las concentraciones estándar están a continuación:

Líneas celulares (E. coli)       

• Línea celular disponible en producción        
• Cepa de clonación similar a DH10Beta   
• Cepa similar a Stbl3 (se puede cultivar a 37 ℃)        

Número de copias              

Solo se permiten los orígenes de replicación constitutivos.

Condiciones de crecimiento     

• Temperatura estándar: 37 ℃/30 ℃   
• Tiempo estándar: Noche/24 horas         
• Las colonias en placa deben alcanzar un tamaño compatible con la automatización después de 16 horas/24 horas de crecimiento en LB-Lennox.

Deberá cargar la secuencia completa del vector en formato GenBank con la secuencia completa del plásmido que se enviará a Twist. Twist secuenciará el vector entrante para garantizar que las secuencias coincidan. Cualquier discrepancia retrasará el proceso de incorporación.

No utilizamos la clonación basada en enzimas de restricción. No incluya nucleótidos adicionales en sus inserciones antes de la digestión de la enzima de restricción seguida de la ligadura del ADN.

Cuando realiza un pedido de un gen clonado, sintetizamos exactamente la secuencia de inserción que nos envía. Si incluye sitios de enzimas de restricción flanqueantes, también los sintetizaremos; los pares de bases adicionales no se eliminan. Las secuencias de inserción no se procesan de ninguna manera una vez que se reciben.  

Si está realizando un pedido de genes clonados utilizando un vector Twist o personalizado, le recomendamos encarecidamente que verifique la secuencia de la construcción final utilizando el botón para descargar secuencias en el diseñador:

Tenga en cuenta que, una vez que se ha realizado un pedido de genes, no podemos alterar la secuencia de ninguna manera; si descubre un error en su estructura, contacte con [email protected] para obtener ayuda.

Proporcione 10 ug de ADN del vector a una concentración de 100 ng/ul en al menos 100 ul. Una cantidad insuficiente de ADN del vector provocará un retraso en el proceso de incorporación.

No, debe incluir la secuencia completa del vector enviado a Twist. Usamos esta información para el control de calidad de la secuencia y para confirmar la estrategia de clonación. Secuenciaremos su vector y lo compararemos con la secuencia que nos envió. Los errores o discrepancias entre los dos resultados de la secuencia pueden retrasar la incorporación de vectores.