Asegúrese de que su vector cumpla con los requisitos siguientes:

• Volumen vectorial ≥ 100 ul (el material plasmídico no se puede enviar en papel de filtro)
• Concentración de vector ≥ 100 ng/ul
• Masa del vector 10 ug
• Debe tener un origen de replicación bacteriano (no en un número de copias bajo)
• Debe ser población clonal
• Debe ser circular
• Debe tener un marcador de resistencia a antibióticos
• No debe contener homopolímeros/secuencia repetitiva > 9 pb dentro de los 40 pb del sitio de inserción
• Repeticiones: debe contener al menos 40 pb de secuencia única sin repeticiones directas o invertidas > 19 pb antes y después del sitio de inserción
• No debe contener ccdB en el producto genético final
• Debe poder linealizar por el sitio de la enzima de restricción dentro de los 50 pb del sitio de inserción
• Debe ser compatible con BSL-1

Resistencia a antibióticos:

El plásmido debe contener uno de los siguientes marcadores de resistencia a antibióticos para la E. coli. Las concentraciones estándar están a continuación:

Antibiótico	Concentración estándar disponible en producción (ug/ml)
Kan	50
AMP	100
CHLOR	25
APRA	50
SPEC	100
TET	10
ZEO	50
BLAST	100

Líneas celulares (E. coli)       

• Línea celular disponible en producción        
• Cepa de clonación similar a DH10Beta   
• Cepa similar a Stbl3 (se puede cultivar a 37 ℃)        

Número de copias              

Solo se permiten los orígenes de replicación constitutivos.

Definición de Twist	Aceptado	Ejemplo
Alto	Sí	ColE1/pMB1/pBR322/pUC
Medio	Sí, rendimiento de minipreparación reducido	p15A
Bajo	No	pSC101

Condiciones de crecimiento     

• Temperatura estándar: 37 ℃/30 ℃   
• Tiempo estándar: Noche/24 horas         
• Las colonias en placa deben alcanzar un tamaño compatible con la automatización después de 16 horas/24 horas de crecimiento en LB-Lennox.