Este protocolo detalla los pasos necesarios para preparar bibliotecas con identificadores moleculares únicos (UMI). Esto permite diversos tipos de entradas, lo que incluye pequeños fragmentos de ADN, como ADN sin células (ADNlc), y ADN genómico de alto peso molecular (ADNg). El flujo de trabajo genera bibliotecas indexadas y amplificadas con etiquetas UMI para el enriquecimiento y la secuenciación del objetivo posteriores en los sistemas de secuenciación de última generación (NGS) de Illumina. Los productos necesarios para este flujo de trabajo incluyen el kit de preparación de bibliotecas Twist con mezcla de amplificación, la fragmentación mecánica y el sistema de adaptadores de UMI Twist (incluye adaptadores de UMI Twist y cebadores de índice doble único [UDI]). Este protocolo de preparación de bibliotecas está optimizado para su uso con los kits de enriquecimiento del objetivo Twist y solo debe realizarse con los reactivos especificados o sus equivalentes.