Une fois mon vecteur intégré, comment puis-je confirmer que mon insert est correctement positionné ?

Après avoir fourni vos inserts au concepteur et sélectionné votre vecteur personnalisé, téléchargez la séquence de construction finale depuis le site Web de Twist.

Détails ci-dessous :

Pendant la commande :

Sur la page des ébauches, le bouton « Télécharger des séquences » vous fournit des détails sur l’insert, le vecteur et la séquence de construction finale pour l’ensemble de votre commande.

Sur la page de l’éditeur de gènes, le bouton « Télécharger une construction (GenBank) » vous fournit un fichier GenBank annoté avec la séquence de construction finale.

Une fois la commande passée :

Accédez à la section « Commandes et ébauches » depuis la page d’accueil, puis cliquez sur « Commandes en cours ». Localisez la commande qui vous intéresse et les informations sur la commande s’affichent. Vous pouvez cliquer sur le bouton « Séquences envoyées d’origine » pour télécharger un fichier avec vos séquences finales.

Vous avez encore des questions ? Contactez-nous

Si j’utilise des enzymes de restriction pour le clonage, comment dois-je concevoir mon site d’insertion ?

Nous utilisons une méthode de clonage exclusive basée sur l’homologie pour assembler nos gènes clonaux. Les sites de restriction ne sont donc pas essentiels au clonage et vous n’avez pas besoin de tenir compte de la conception du clonage de Twist lors de la conception de votre insert. Cependant, si votre site d’insertion se trouve entre deux sites de restriction, incluez-les dans le squelette du vecteur, afin de vous assurer que les caractéristiques sont dans le cadre.

Il existe deux options d’utilisation du clonage d’enzymes de restriction.

Option 1 : inclure des sites de restriction sur l’insert

Incluez le site enzymatique de restriction entier à chaque extrémité de la séquence d’insertion. Le sites enzymatiques de restriction feront partie des inserts in silico.

Lorsque vous commandez des gènes, vous devez inclure des sites enzymatiques de restriction sur les inserts. Dans ce scénario d’intégration de vecteur personnalisé, si vous excluez les sites enzymatiques de restriction sur les gènes dans votre commande, les sites enzymatiques de restriction seront totalement absents de votre produit final.

Option 2 : inclure des sites de restriction sur le vecteur

N’incluez pas les sites enzymatiques de restriction sur la séquence d’insertion. Incluez chaque site enzymatique de restriction complet dans la case Vecteur + Insert du formulaire d’intégration Vecteur personnalisé. Les sites enzymatiques de restriction feront partie du vecteur in silico.

Lorsque vous commandez des gènes, n’incluez pas de sites enzymatiques de restriction sur les inserts. Dans ce scénario d’intégration de vecteur personnalisé, si vous incluez des sites enzymatiques de restriction sur les gènes dans votre commande, les sites enzymatiques de restriction seront dupliqués dans votre produit final.

Vous avez encore des questions ? Contactez-nous

Comment procéder si j’ai plusieurs méthodes de clonage pour le même vecteur ?

Après avoir conçu votre site d’insertion sur l’application, cliquez sur le lien « Preview and Add » (Aperçu et ajout) à côté de la case du numéro, pour revoir le site d’insertion, soit sous forme de carte, soit sous forme de séquence. Après avoir vérifié le site d’insertion et déterminé qu’il est correctement configuré, sélectionnez « Approuver le point d’insertion ». Les détails du site d’insertion apparaîtront sous la forme d’une ligne sous la rubrique « SITES D’INSERTION » sur le côté gauche du panneau, et vous pourrez continuer à modifier votre projet avec de nouveaux sites d’insertion. Cependant, veuillez noter que l’on peut ajouter plusieurs sites d’insertion à chaque vecteur personnalisé. Un seul insert peut être cloné dans un vecteur à la fois.

Remarque : Si vous souhaitez ajouter un point d’insertion à un vecteur que l’on a déjà intégré, il est inutile de nous envoyer une nouvelle aliquote de vecteur. Contactez toutefois le service client à l’adresse suivante customersupport@twistbioscience.com, car il vous faudra utiliser un nouveau formulaire d’envoi.

Un vecteur avec un site d’insertion est considéré comme un cas d’intégration. Des sites d’insertion multiples produiront plusieurs cas d’intégration.

Des frais d’intégration fixes de 500 $ s’appliquent pour le premier site d’insertion, et de 250 $ pour chaque site d’insertion supplémentaire par vecteur personnalisé.