Après le clonage, combien de colonies dois-je prélever pour augmenter mes chances de trouver un clone ayant la bonne séquence ?

Pour les séquences présentant une complexité standard et compte tenu de notre taux d’erreur de 1 sur 7 500, la sélection du nombre recommandé de colonies, comme le montre le graphique, offre une probabilité de 95 % dans la détection d’une colonie présentant la séquence correcte.

Notez que cette recommandation constitue un point de départ. Divers facteurs, notamment le type de vecteur, la complexité de la séquence et le contenu de la séquence, peuvent affecter la croissance de la colonie. Dans certains cas, il peut être nécessaire de sélectionner 2 à 3 fois le nombre de colonies recommandé.

 

Choix des colonies


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Quel est le prix d’un fragment de gène ?

Vous trouverez le tableau des prix des produits de fragment de gène dans votre compte en cliquant ici.

Si vous avez besoin de contacter votre gestionnaire de compte au sujet de la tarification, ses coordonnées sont disponibles dans eCommerce, sous Compte.


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Où puis-je trouver un certificat d’analyse (COA) pour un fragment de gène ?

Des certificats d’analyse (certificates of analysis, COA) sont disponibles pour les commandes traitées. Vous trouverez le certificat d’analyse des produits de fragment de gène dans votre compte en cliquant ici.


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Quelles sont les séquences d’adaptateurs utilisées sur les Adapter-On Gene Fragments ?

  • Pour les commandes reçues avant le 9 août 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
    • Adaptateur 3’ : AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
    • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

 

  • Pour les commandes reçues entre le 9 août 2021 et le 1er novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
    • Adaptateur 3’ : AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
    • 5’ – CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT – insert – AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG – 3’

 

  • Pour les commandes reçues après le 2 novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : CAATCCGCCCTCACTACAACCG
    • Adaptateur 3’ : CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
    • 5’ – CAATCCGCCCTCACTACAACCG – insert – CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA – 3’

 

*Les adaptateurs sont de courtes séquences ajoutées à chaque extrémité de l’insert dans le cadre de notre procédé de synthèse. Des fragments de gènes sans ces adaptateurs sont également disponibles lors du processus de commande.

Si vous avez des questions concernant votre commande, veuillez nous contacter à l’adresse suivante [email protected]


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Des séquences d’adaptateurs sont-elles ajoutées aux extrémités de mes séquences ?

Pour les Adapter-On Gene Fragments, des adaptateurs universels sont synthétisés sur les extrémités de chaque fragment. Les adaptateurs font 21 à 22 nucléotides de long. Les fragments comportant ces adaptateurs sont compatibles avec un certain nombre de méthodes d’assemblage, à savoir digestion/ligation par restriction, Gateway, Golden Gate et clonage TOPO.

Il est possible d’ajouter des sites de restriction dans les adaptateurs pour supprimer des adaptateurs. La méthode de clonage TOPO fonctionne, mais conserve les adaptateurs. 

 

SÉQUENCES D’ADAPTATEURS

  • Pour les commandes reçues avant le 9 août 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
    • Adaptateur 3’ : AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
    • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

 

  • Pour les commandes reçues entre le 9 août 2021 et le 1er novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
    • Adaptateur 3’ : AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
    • 5’ – CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT – insert – AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG – 3’

 

  • Pour les commandes reçues après le 2 novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : CAATCCGCCCTCACTACAACCG
    • Adaptateur 3’ : CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
    • 5’ – CAATCCGCCCTCACTACAACCG – insert – CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA – 3’

 

*Les adaptateurs sont de courtes séquences ajoutées à chaque extrémité de l’insert dans le cadre de notre procédé de synthèse. Des fragments de gènes sans ces adaptateurs sont également disponibles lors du processus de commande. 

Si vous avez des questions concernant votre commande, veuillez nous contacter à l’adresse suivante [email protected]  

 


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Quelles méthodes puis-je utiliser pour cloner mes Adapter-On Gene Fragments ?

Les méthodes suivantes sont disponibles pour cloner des fragments de gènes avec des adaptateurs :

Digestion de restriction/Ligation : placez les sites de restriction dans les adaptateurs Twist pour un clonage facilité

Type IIS ou méthode Golden Gate : placez les sites de restriction dans les adaptateurs Twist pour un clonage facilité TOPO (extrémité émoussée) : les séquences d’adaptateur seront également clonées

Clonage Gateway : ajoutez des sites attB aux extrémités de votre séquence

Pour obtenir plus d’informations, cliquez ici.  


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Les fragments de gènes sont-ils purifiés ?

Oui, les fragments de gènes subissent un nettoyage par billes ; cependant, de petites quantités de fragments courts peuvent être transmises.


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Après le clonage, combien de colonies dois-je prélever pour augmenter mes chances de trouver un clone ayant la bonne séquence ?

Pour les séquences présentant une complexité standard et compte tenu de notre taux d’erreur de 1 sur 7 500, la sélection du nombre recommandé de colonies, comme le montre le graphique, offre une probabilité de 95 % dans la détection d’une colonie présentant la séquence correcte.

Notez que cette recommandation constitue un point de départ. Divers facteurs, notamment le type de vecteur, la complexité de la séquence et le contenu de la séquence, peuvent affecter la croissance de la colonie. Dans certains cas, il peut être nécessaire de sélectionner 2 à 3 fois le nombre de colonies recommandé.

 

Choix des colonies


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Quel est le prix d’un fragment de gène ?

Vous trouverez le tableau des prix des produits de fragment de gène dans votre compte en cliquant ici.

Si vous avez besoin de contacter votre gestionnaire de compte au sujet de la tarification, ses coordonnées sont disponibles dans eCommerce, sous Compte.


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Où puis-je trouver un certificat d’analyse (COA) pour un fragment de gène ?

Des certificats d’analyse (certificates of analysis, COA) sont disponibles pour les commandes traitées. Vous trouverez le certificat d’analyse des produits de fragment de gène dans votre compte en cliquant ici.


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Quelles sont les séquences d’adaptateurs utilisées sur les Adapter-On Gene Fragments ?

  • Pour les commandes reçues avant le 9 août 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
    • Adaptateur 3’ : AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
    • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

 

  • Pour les commandes reçues entre le 9 août 2021 et le 1er novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
    • Adaptateur 3’ : AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
    • 5’ – CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT – insert – AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG – 3’

 

  • Pour les commandes reçues après le 2 novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : CAATCCGCCCTCACTACAACCG
    • Adaptateur 3’ : CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
    • 5’ – CAATCCGCCCTCACTACAACCG – insert – CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA – 3’

 

*Les adaptateurs sont de courtes séquences ajoutées à chaque extrémité de l’insert dans le cadre de notre procédé de synthèse. Des fragments de gènes sans ces adaptateurs sont également disponibles lors du processus de commande.

Si vous avez des questions concernant votre commande, veuillez nous contacter à l’adresse suivante [email protected]


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Des séquences d’adaptateurs sont-elles ajoutées aux extrémités de mes séquences ?

Pour les Adapter-On Gene Fragments, des adaptateurs universels sont synthétisés sur les extrémités de chaque fragment. Les adaptateurs font 21 à 22 nucléotides de long. Les fragments comportant ces adaptateurs sont compatibles avec un certain nombre de méthodes d’assemblage, à savoir digestion/ligation par restriction, Gateway, Golden Gate et clonage TOPO.

Il est possible d’ajouter des sites de restriction dans les adaptateurs pour supprimer des adaptateurs. La méthode de clonage TOPO fonctionne, mais conserve les adaptateurs. 

 

SÉQUENCES D’ADAPTATEURS

  • Pour les commandes reçues avant le 9 août 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
    • Adaptateur 3’ : AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
    • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

 

  • Pour les commandes reçues entre le 9 août 2021 et le 1er novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
    • Adaptateur 3’ : AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
    • 5’ – CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT – insert – AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG – 3’

 

  • Pour les commandes reçues après le 2 novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
    • Adaptateur 5' : CAATCCGCCCTCACTACAACCG
    • Adaptateur 3’ : CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
    • 5’ – CAATCCGCCCTCACTACAACCG – insert – CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA – 3’

 

*Les adaptateurs sont de courtes séquences ajoutées à chaque extrémité de l’insert dans le cadre de notre procédé de synthèse. Des fragments de gènes sans ces adaptateurs sont également disponibles lors du processus de commande. 

Si vous avez des questions concernant votre commande, veuillez nous contacter à l’adresse suivante [email protected]  

 


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Quelles méthodes puis-je utiliser pour cloner mes Adapter-On Gene Fragments ?

Les méthodes suivantes sont disponibles pour cloner des fragments de gènes avec des adaptateurs :

Digestion de restriction/Ligation : placez les sites de restriction dans les adaptateurs Twist pour un clonage facilité

Type IIS ou méthode Golden Gate : placez les sites de restriction dans les adaptateurs Twist pour un clonage facilité TOPO (extrémité émoussée) : les séquences d’adaptateur seront également clonées

Clonage Gateway : ajoutez des sites attB aux extrémités de votre séquence

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Oui, les fragments de gènes subissent un nettoyage par billes ; cependant, de petites quantités de fragments courts peuvent être transmises.


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