Ingénierie de voie par le biais de la synthèse de gène 5 kb

Des gènes clonés jusqu’à 5 kb peuvent être utilisés pour coder des voies entières afin de banaliser l’étape de l’élaboration dans le cycle conception-élaboration-test.

Le cycle conception-élaboration-test est essentiel pour les applications d’ingénierie métabolique dans lesquelles les chercheurs reprogramment des microorganismes afin de produire des molécules d’intérêt non originelles. Néanmoins, reprogrammer des cellules pour synthétiser des molécules dans des volumes suffisants pour une purification nécessite souvent de nombres itérations pour obtenir des titrages viables. Des innovations permettant un cycle de conception-élaboration-test rapide sont donc fortement demandées. À titre de processus accéléré de validation de principe pour les tests de gènes multiples à haut débit, nous avons utilisé la plateforme de synthèse des oligonucléotides de Twist pour synthétiser des gènes d’une longueur atteignant 5 kb. Plusieurs gènes impliqués dans les voies de synthèse des caroténoïdes ont été clonés au sein d’un plasmide unique, ce qui a permis de produire rapidement de précieuses molécules de pigments.


Abordé dans cette note d’application
Conception d’une voie de synthèse de caroténoïde pour un châssis d’E. coli.
Une construction banale de voie à l’aide de la plateforme de commande et de synthèse de Twist
Tests de la synthèse des caroténoïdes.
Optimisation de la voie pour produire de précieuses molécules de pigment.
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