一般

遺伝子の製造に関して違いはありません。また品質に関しても違いはありませんので、お客様のお好みの形式でご注文ください。保管のしやすさのため、プレートよりもチューブを希望されるお客様がいらっしゃいます。一方で、ハイスループットなワークフローを採用しているという理由で、プレートを希望されるお客様もいらっしゃいます。ただし、10 個以上の遺伝子をご注文の際にチューブでの納品をご希望されますと、一律 50 ドルの追加料金がかかりますのでご注意ください。

Gene Fragments（アダプター付き・なしのいずれも）をご利用の場合、選択するベクターへのクローニングを簡単にするために、各フラグメントの両末端にお客様ご自身で制限酵素部位を付加いただくことをおすすめしています。

Clonal Genes の場合は、ベクターバックボーンに組み込みたいお客様ご自身のインサート配列のみをご提出ください。Twist では、独自のホモロジーベースのクローニング手法を用いて Clonal Genes を構築しており、相同オーバーハング配列の設計および付加は当社で行います。そのため、インサート設計時にクローニング戦略をご考慮いただく必要はありません。

なお、Twist の Cloning Vectorには、インサート部位付近に制限酵素部位が配置されていませんのでご注意ください。ベクターに配置しないことで柔軟なデザインが可能となり、後工程で必要な制限酵素部位をご自由にインサート両側に追加いただけます。

TwistのExpression Vectorへの挿入箇所は、2つの制限酵素部位で規定されています。これらの酵素認識配列は、最終製品では挿入箇所の真横にそのまま保持されます。最終配列はデザインページの「Download sequences」ボタンをクリックしてご確認ください。なお、製造工程へ進んだご注文内容の変更は承ることができません。

Twist はすべての Clonal Genes（プラスミド DNA）合成製品について、NGS を用いて配列の検証を行っています。

一方、Gene Fragments（二本鎖 DNA 断片）については NGS での検証は行っていません。遺伝子合成のエラー率は低く、600 bp、1200 bp、1800 bpのGene Fragmentで配列が完全一致するクローンを99％の信頼度で取得するためには、それぞれ3、4、6クローンをピックアップ、シーケンス確認することを推奨しています。

Twist Bioscience では、DNA 製品を乾燥状態や、2 mL マイクロ遠心チューブ、96 ウェルプレートまたは 384 ウェルプレートに再懸濁させた状態で出荷しています。乾燥させた DNA は常温で、再懸濁させた DNA は冷凍で出荷されます。

二本鎖 DNA および一本鎖オリゴヌクレオチドは、ほとんどのラボで採用されている標準的な保存条件において安定です。しかし、Twist Bioscience で合成された DNA の品質を高い状態に保つには、以下のような保存条件を推奨しています。

• Twistでは、乾燥DNAの保存期間について、保存条件に応じて以下の期間を推奨しています。
  • 室温：3 ヶ月
  • 4 °C： 12 ヶ月
  • −20 °C ： 24 ヶ月
  • −80 °C ：長期保存
• 再懸濁のガイドライン
  • 再懸濁する場合は、開封前にチューブまたはプレートを軽く遠心してください。ヌクレアーゼフリーの Tris-EDTA（TE）バッファー（pH 8.0）または 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）で目的濃度に再懸濁してください。
  • ストック溶液（希釈液）の濃度は 10 ng/μL 以上を推奨しますが、最適濃度はご使用のアプリケーションに応じて設定してください。
  • ストック溶液とは別に必要量ずつ分注して保存すると、コンタミネーションを防ぎ、凍結・融解のサイクルを減らすことができます。分注液は速やかに使用し、高温に長くさらさないようにご注意ください。
• 再懸濁させた DNA
  • 一部製品では再懸濁させた状態でお届けすることが可能です。お客様からご注文をいただいた DNA は、以下のいずれかのバッファーに再懸濁させた状態でお届けします。開封前にチューブやプレートを軽く遠心分離機にかけることを推奨します。
    • 溶出バッファー（2 mM Tris-Cl、pH 8.5）
    • TE バッファー（10 mM Tris-Cl、pH 8.0、1 mM EDTA）
    • 低 EDTA TE バッファー（10 mM Tris-Cl、pH 8.0、0.1 mM EDTA）
    • 水       
      • 水での長期保存は推奨していません。
  • Twist は、再懸濁させた DNA については保管条件に応じて以下の期間内にお使いいただくことを推奨します。
    • 室温：3 ヶ月
    • 4 °C： 12 ヶ月
    • −20 °C ： 24 ヶ月
    • −80 °C ：長期保存

Clonal Genesをご発注いただく場合、チェックアウト時に、プラスミド調製の一環として提供される DNA 量を指定するオプションを選択できます。DNA量は自動的に測定され、お客様に対して保証されます。1 回の調製で必要量に達しない場合は、ご指定量に達するまで追加で調製を行います。

現在、Gene Fragments（直鎖状二本鎖 DNA）の最長鎖長は 5 kb です。Clonal Genes（ベクターにクローニングされた遺伝子）の最長鎖長は 5 kb です。

Twist の DNA 製品は乾燥状態で、96／384 ウェルプレートまたは 2 ml マイクロチューブで出荷されます。二本鎖 DNA は標準的な保存条件において安定ですが、 DNA を高い品質で維持するために、再懸濁や保存については以下を推奨します。

• 受領後、チューブまたはプレートを軽く遠心し、 DNA をヌクレアーゼフリーの Tris-EDTA（TE）バッファー（pH 8.0）または 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）にご希望の濃度で再懸濁します。
• 水での再懸濁は推奨していません。
• ストック溶液の濃度は少なくとも 10 ng/μl を推奨しますが、ご希望の用途に応じて最適な濃度を決定してください。
• 作業用にはストック溶液とは別に必要量ずつ分注して保存していただくと、コンタミネーションの可能性を抑え、凍結・融解のサイクルを減らすことができます。
• 長期保存する場合、保存期間が 1 年以内の場合は DNA を −20 °C、さらに長期間保存する場合は DNA を −80 °Cで保存してください。

再懸濁ガイドラインはこちらです。

遺伝子製品は、特に指定のない限り、通常は乾燥ペレットの状態で納品されます。

Clonal Genes は、Twist のカタログベクターまたはお客様独自のカスタムベクターにクローニングした状態で納品されます。Gene Fragments は、直鎖二本鎖配列として納品されます（アダプターの有無はご選択ください）。

これらの遺伝子配列は 96 ウェルプレートまたは 384 ウェルプレートにて納品します。少量のご注文（10 種類未満）の場合、追加料金なしで遺伝子をチューブで納品することも可能です。10 種類以上の遺伝子をご注文の場合、チューブでの納品には 1 回のご注文につき 50 ドルの追加料金がかかります。

Twist Bioscience は、アメリカ合衆国科学技術政策局（OSTP）の Framework for Nucleic Acid Synthesis Screening（核酸合成スクリーニングフレームワーク）に定められたすべての要件を遵守していることを表明しています。宣誓書のダウンロードはこちらから。

Clonal Genesの保証最低収量は 50 ng に設定されています。NGSによる配列検証後、ごく一部のケースではこの最低保証収量に達しない場合がありますが、その場合でも回収可能なすべてのDNAを出荷します。

そのようなコンストラクトについては、収量が「NA」と記載されます。大腸菌への形質転換することで、コンストラクトを回収できる場合があります（詳しくはカスタマーサポートにお問い合わせください）。なお、保証最低収量に満たないコンストラクトについては、料金は請求されません。

アダプター付き Gene Fragments の場合、納期は 2 ～ 4 営業日、アダプターなし Gene Fragments の場合、 4 ～ 8 営業日です。

Clonal Genes の場合、Express の納期は 4 ～ 7 営業日、Standard の納期は 10 営業日です。

Clonal Genes の納品スケジュールは、合成とクローニングが正常に完了するまでの時間を基準にしています。遺伝子がいずれかの工程で失敗した場合、リカバリープロセスに入るため納期が遅れる可能性があります。また、オプションサービス（より高い収量など）をご要望いただいた場合は、追加で納期が発生する場合があります。

製造工程において牛由来の感染性疾患のリスクを排除するため、Twistでは、クローニング、形質転換、スケールアップ、精製の各工程において動物由来原料を使用せずに製造した精製DNAコンストラクトを提供しています。

NGS 製品の安全データシート（SDS）のみ当社ウェブページに掲載しています。合成生物学製品の SDS につきましては、[email protected] までメールでお問い合わせください。

お客様がご自身のアカウントにログインすると、すべての注文について、プレートマップ情報をダウンロードできます。

メインページから「Order & Drafts」をクリックし、「Past Orders」をクリックします。 Twist でのすべての注文が表示されますので、確認したい注文をクリックすると、「Delivered」タブ内にプレートマップをダウンロードするためのリンクが表示されます。

現在、 Twist の遺伝子合成製品（Gene Fragments または Clonal Genes）の最短鎖長は 300 bp です。

Gene Fragments は、アセンブリ後にフラグメント解析でサイズと純度を確認します。配列の検証は行われません。したがって、Gene Fragments はノンクローナルな状態です（完全な配列と、そうでないものが混在しています）。そのため、遺伝子断片をクローニングする場合は、複数のクローンから選抜することが重要です。Gene Fragments は、300 ～ 5,000 bp の範囲で合成できます。

一方、Clonal Genes はアセンブリ後、カスタムベクターまたは Twist のカタログベクターのいずれかにクローニングされます。その後、クローンは NGS で配列検証され、ご依頼通りの配列のみが出荷・納品されます。Clonal Genes は、300 ～ 5,000 bp の範囲で合成できます。

Gene Fragments（二本鎖 DNA 断片）につきましては、1 断片あたり 100 ～ 1000 ng の収量を保証します。

Clonal Genes（プラスミド DNA）につきましては、以下の収量オプションをご利用いただけます。

• マイクロプレップ：1 µg ～ 4 µg / クローン
• ミニプレップ：4 μg ～ 10 µg / クローン
• ミディプレップ：10 µg ～ 100 µg / クローン
• マキシプレップ：100 µg ～ 1 mg / クローン

ご依頼の配列（Clonal Genes の場合はベクターも）によっては、収量が少なくなる場合があります。収量が著しく低い場合、合成失敗と判断されます。収量不足により合成失敗となった配列も出荷されますが、その場合には請求は行われません。Mini Prepスケールに関しては、Target Yieldオプションもご用意しています。

遺伝子の製造に関して違いはありません。また品質に関しても違いはありませんので、お客様のお好みの形式でご注文ください。保管のしやすさのため、プレートよりもチューブを希望されるお客様がいらっしゃいます。一方で、ハイスループットなワークフローを採用しているという理由で、プレートを希望されるお客様もいらっしゃいます。ただし、10 個以上の遺伝子をご注文の際にチューブでの納品をご希望されますと、一律 50 ドルの追加料金がかかりますのでご注意ください。

Gene Fragments（アダプター付き・なしのいずれも）をご利用の場合、選択するベクターへのクローニングを簡単にするために、各フラグメントの両末端にお客様ご自身で制限酵素部位を付加いただくことをおすすめしています。

Clonal Genes の場合は、ベクターバックボーンに組み込みたいお客様ご自身のインサート配列のみをご提出ください。Twist では、独自のホモロジーベースのクローニング手法を用いて Clonal Genes を構築しており、相同オーバーハング配列の設計および付加は当社で行います。そのため、インサート設計時にクローニング戦略をご考慮いただく必要はありません。

なお、Twist の Cloning Vectorには、インサート部位付近に制限酵素部位が配置されていませんのでご注意ください。ベクターに配置しないことで柔軟なデザインが可能となり、後工程で必要な制限酵素部位をご自由にインサート両側に追加いただけます。

TwistのExpression Vectorへの挿入箇所は、2つの制限酵素部位で規定されています。これらの酵素認識配列は、最終製品では挿入箇所の真横にそのまま保持されます。最終配列はデザインページの「Download sequences」ボタンをクリックしてご確認ください。なお、製造工程へ進んだご注文内容の変更は承ることができません。

Twist はすべての Clonal Genes（プラスミド DNA）合成製品について、NGS を用いて配列の検証を行っています。

一方、Gene Fragments（二本鎖 DNA 断片）については NGS での検証は行っていません。遺伝子合成のエラー率は低く、600 bp、1200 bp、1800 bpのGene Fragmentで配列が完全一致するクローンを99％の信頼度で取得するためには、それぞれ3、4、6クローンをピックアップ、シーケンス確認することを推奨しています。

Twist Bioscience では、DNA 製品を乾燥状態や、2 mL マイクロ遠心チューブ、96 ウェルプレートまたは 384 ウェルプレートに再懸濁させた状態で出荷しています。乾燥させた DNA は常温で、再懸濁させた DNA は冷凍で出荷されます。

二本鎖 DNA および一本鎖オリゴヌクレオチドは、ほとんどのラボで採用されている標準的な保存条件において安定です。しかし、Twist Bioscience で合成された DNA の品質を高い状態に保つには、以下のような保存条件を推奨しています。

• Twistでは、乾燥DNAの保存期間について、保存条件に応じて以下の期間を推奨しています。
  • 室温：3 ヶ月
  • 4 °C： 12 ヶ月
  • −20 °C ： 24 ヶ月
  • −80 °C ：長期保存
• 再懸濁のガイドライン
  • 再懸濁する場合は、開封前にチューブまたはプレートを軽く遠心してください。ヌクレアーゼフリーの Tris-EDTA（TE）バッファー（pH 8.0）または 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）で目的濃度に再懸濁してください。
  • ストック溶液（希釈液）の濃度は 10 ng/μL 以上を推奨しますが、最適濃度はご使用のアプリケーションに応じて設定してください。
  • ストック溶液とは別に必要量ずつ分注して保存すると、コンタミネーションを防ぎ、凍結・融解のサイクルを減らすことができます。分注液は速やかに使用し、高温に長くさらさないようにご注意ください。
• 再懸濁させた DNA
  • 一部製品では再懸濁させた状態でお届けすることが可能です。お客様からご注文をいただいた DNA は、以下のいずれかのバッファーに再懸濁させた状態でお届けします。開封前にチューブやプレートを軽く遠心分離機にかけることを推奨します。
    • 溶出バッファー（2 mM Tris-Cl、pH 8.5）
    • TE バッファー（10 mM Tris-Cl、pH 8.0、1 mM EDTA）
    • 低 EDTA TE バッファー（10 mM Tris-Cl、pH 8.0、0.1 mM EDTA）
    • 水       
      • 水での長期保存は推奨していません。
  • Twist は、再懸濁させた DNA については保管条件に応じて以下の期間内にお使いいただくことを推奨します。
    • 室温：3 ヶ月
    • 4 °C： 12 ヶ月
    • −20 °C ： 24 ヶ月
    • −80 °C ：長期保存

Clonal Genesをご発注いただく場合、チェックアウト時に、プラスミド調製の一環として提供される DNA 量を指定するオプションを選択できます。DNA量は自動的に測定され、お客様に対して保証されます。1 回の調製で必要量に達しない場合は、ご指定量に達するまで追加で調製を行います。

現在、Gene Fragments（直鎖状二本鎖 DNA）の最長鎖長は 5 kb です。Clonal Genes（ベクターにクローニングされた遺伝子）の最長鎖長は 5 kb です。

Twist の DNA 製品は乾燥状態で、96／384 ウェルプレートまたは 2 ml マイクロチューブで出荷されます。二本鎖 DNA は標準的な保存条件において安定ですが、 DNA を高い品質で維持するために、再懸濁や保存については以下を推奨します。

• 受領後、チューブまたはプレートを軽く遠心し、 DNA をヌクレアーゼフリーの Tris-EDTA（TE）バッファー（pH 8.0）または 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）にご希望の濃度で再懸濁します。
• 水での再懸濁は推奨していません。
• ストック溶液の濃度は少なくとも 10 ng/μl を推奨しますが、ご希望の用途に応じて最適な濃度を決定してください。
• 作業用にはストック溶液とは別に必要量ずつ分注して保存していただくと、コンタミネーションの可能性を抑え、凍結・融解のサイクルを減らすことができます。
• 長期保存する場合、保存期間が 1 年以内の場合は DNA を −20 °C、さらに長期間保存する場合は DNA を −80 °Cで保存してください。

再懸濁ガイドラインはこちらです。

遺伝子製品は、特に指定のない限り、通常は乾燥ペレットの状態で納品されます。

Clonal Genes は、Twist のカタログベクターまたはお客様独自のカスタムベクターにクローニングした状態で納品されます。Gene Fragments は、直鎖二本鎖配列として納品されます（アダプターの有無はご選択ください）。

これらの遺伝子配列は 96 ウェルプレートまたは 384 ウェルプレートにて納品します。少量のご注文（10 種類未満）の場合、追加料金なしで遺伝子をチューブで納品することも可能です。10 種類以上の遺伝子をご注文の場合、チューブでの納品には 1 回のご注文につき 50 ドルの追加料金がかかります。

Twist Bioscience は、アメリカ合衆国科学技術政策局（OSTP）の Framework for Nucleic Acid Synthesis Screening（核酸合成スクリーニングフレームワーク）に定められたすべての要件を遵守していることを表明しています。宣誓書のダウンロードはこちらから。

Clonal Genesの保証最低収量は 50 ng に設定されています。NGSによる配列検証後、ごく一部のケースではこの最低保証収量に達しない場合がありますが、その場合でも回収可能なすべてのDNAを出荷します。

そのようなコンストラクトについては、収量が「NA」と記載されます。大腸菌への形質転換することで、コンストラクトを回収できる場合があります（詳しくはカスタマーサポートにお問い合わせください）。なお、保証最低収量に満たないコンストラクトについては、料金は請求されません。

アダプター付き Gene Fragments の場合、納期は 2 ～ 4 営業日、アダプターなし Gene Fragments の場合、 4 ～ 8 営業日です。

Clonal Genes の場合、Express の納期は 4 ～ 7 営業日、Standard の納期は 10 営業日です。

Clonal Genes の納品スケジュールは、合成とクローニングが正常に完了するまでの時間を基準にしています。遺伝子がいずれかの工程で失敗した場合、リカバリープロセスに入るため納期が遅れる可能性があります。また、オプションサービス（より高い収量など）をご要望いただいた場合は、追加で納期が発生する場合があります。

製造工程において牛由来の感染性疾患のリスクを排除するため、Twistでは、クローニング、形質転換、スケールアップ、精製の各工程において動物由来原料を使用せずに製造した精製DNAコンストラクトを提供しています。

NGS 製品の安全データシート（SDS）のみ当社ウェブページに掲載しています。合成生物学製品の SDS につきましては、[email protected] までメールでお問い合わせください。

お客様がご自身のアカウントにログインすると、すべての注文について、プレートマップ情報をダウンロードできます。

メインページから「Order & Drafts」をクリックし、「Past Orders」をクリックします。 Twist でのすべての注文が表示されますので、確認したい注文をクリックすると、「Delivered」タブ内にプレートマップをダウンロードするためのリンクが表示されます。

現在、 Twist の遺伝子合成製品（Gene Fragments または Clonal Genes）の最短鎖長は 300 bp です。

Gene Fragments は、アセンブリ後にフラグメント解析でサイズと純度を確認します。配列の検証は行われません。したがって、Gene Fragments はノンクローナルな状態です（完全な配列と、そうでないものが混在しています）。そのため、遺伝子断片をクローニングする場合は、複数のクローンから選抜することが重要です。Gene Fragments は、300 ～ 5,000 bp の範囲で合成できます。

一方、Clonal Genes はアセンブリ後、カスタムベクターまたは Twist のカタログベクターのいずれかにクローニングされます。その後、クローンは NGS で配列検証され、ご依頼通りの配列のみが出荷・納品されます。Clonal Genes は、300 ～ 5,000 bp の範囲で合成できます。

Gene Fragments（二本鎖 DNA 断片）につきましては、1 断片あたり 100 ～ 1000 ng の収量を保証します。

Clonal Genes（プラスミド DNA）につきましては、以下の収量オプションをご利用いただけます。

• マイクロプレップ：1 µg ～ 4 µg / クローン
• ミニプレップ：4 μg ～ 10 µg / クローン
• ミディプレップ：10 µg ～ 100 µg / クローン
• マキシプレップ：100 µg ～ 1 mg / クローン

ご依頼の配列（Clonal Genes の場合はベクターも）によっては、収量が少なくなる場合があります。収量が著しく低い場合、合成失敗と判断されます。収量不足により合成失敗となった配列も出荷されますが、その場合には請求は行われません。Mini Prepスケールに関しては、Target Yieldオプションもご用意しています。