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Twist Bioscience本社
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Multiple Focused CRISPR Libraries from a Single Oligo Pool
CRISPR /Cas9システムを用いた機能的な遺伝子スクリーニングは、遺伝子の機能を大規模に調査するための強力なツールです。ですが、この技術へのアクセスと実装は、これまでに決められたCRISPR sgRNAライブラリによって制約されています。そこで、1つのTwistオリゴプールを、バイオインフォマティクスとウェットラボのワークフローであるCustom Library Multiplexed Cloning (CLUE; crispr-clue.de)と組み合わせて使用し、多数の高品質なカスタムsgRNAライブラリを生成しました。Twistオリゴプールの卓越した忠実性により、クロスライブラリの汚染がなく、得られるCLUEライブラリーのsgRNA発現が均一に保たれます。CRISPRスクリーニングアプリケーションで成功するための厳しい要件が満たされるのです。
このアプリケーションノートからわかること
CLUEがいかに複数のガイドライブラリに用いられるか
Twistライブラリの品質が、多重化解除を確実に成功させる理由
大規模なプールから多重化解除された100個のガイドにより集中CRISPRiスクリーンを実施
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