Dickkopf-1（DKK1）は、腫瘍の微小環境において過剰発現することが知られている内因性タンパク質です。これまでの研究で、抗DKK1抗体の抗腫瘍効果が複数の異なるがんで示されています。Twist Biopharma Solutionsの学際的なゴールドスタンダードプラットフォームは、抗体探索開発のためのin vitro、in vivo、in silicoアプローチを統合したものです。このキャンペーンでは、Twistのin vitroおよびin silicoアプローチを活用し、Twistの多様性の高い合成ファージライブラリと機械学習戦略を活用して、強力な抗DKK1抗体を発見しました。2つの合成ヒト化VHHライブラリをファージディスプレイを用いてパニング、ファージパニングアウトプットをELISAでスクリーニングし、潜在的な候補を特定しました。パンニングの出力は、次世代シーケンス（NGS）によってもシーケンスされました。NGSの出力は様々な機械学習モデルで活用され、さらなる潜在的候補を予測しました。Sequences were reformatted into VHH-Fc, and synthesized and produced with Twist’s high throughput synthesis and production platform.  Resulting antibodies were evaluated for binding on SPR, as well as further downstream characterization and in vivo studies. さらに、私たちのモジュール式VHHプラットフォームにより、有望なmAbを二重特異性抗体（bsAb）に迅速に再形成することができました。

Twist Biopharma Solutionsは、in vitroおよびin vivoの統合抗体探索プラットフォームを活用し、効率的な抗体治療薬を開発するために、パートナーとの共同研究に取り組んでいます。このプレゼンテーションでは、当社のライブラリーを用いた抗4-1BB-Nectin-4二重特異性抗体（bsAbs）の発見、それに続くハイスループット抗体作製（HTIgG）、表面プラズモン共鳴（SPR）特性評価、および細胞ベースのアッセイについて紹介します。4-1BBは広く発現し、強固な免疫応答に重要な多様なシグナル伝達経路を活性化することから、汎用性の高い免疫治療標的として大きな注目を集めています。同時に、ネクチン-4は、乳癌、肺癌、卵巣癌を含む様々な固形癌で過剰発現していることから、魅力的な精密医療ターゲットとして浮上してきました。当社の最有力候補化合物は、シグナル伝達アッセイおよび免疫細胞活性化アッセイにおいて確固たる有効性を示しました。このような有望な結果は、これらの候補物質が前臨床試験でさらに検討される価値があり、治療用抗体として開発される可能性があることを示しています。

Twist の精密 DNA 合成技術により、複数の高多様性合成抗体ライブラリが作製され、抗体の開発プロセス強化に貢献しています。これらの「Library of Libraries」には、Structural scFv Library、AI Hypermutated scFv Library、hCamel Zero VHH Library などがあります。By leveraging these synthetic libraries, a wide range of high-affinity antibody candidates have been identified across multiple protein targets.  In this project, we demonstrate the validation process of constructed synthetic antibody libraries. ファージディスプレイを用いて、ビオチン化タンパク質標的に対するライブラリをパニングし、ELISA 結合アッセイを行ってユニーク候補をスクリーニングしました。ハイスループットなタンパク質精製プロセスで抗体候補は VHH-Fc または IgG に再構成され、SPR で特性評価されます。