次世代シーケンシング (NGS) における進歩により、ランあたりのデータ生成量が増加することで、シーケンシングコストが継続的に削減されています。このシーケンシングコストの削減によって、集団レベルでのゲノム実験が可能になり、遺伝性疾患の研究や診断に寄与しています。シーケンサーの進歩にもかかわらず、NGS ライブラリ調製は、個々のサンプルを処理するのに必要なコストと労力によって、効率化が妨げられています。シーケンシングリードを均等に分配するためには、ライブラリを定量してプールする必要がありますが、サンプル数が増えるにつれて、それは大変面倒で、コストや時間がかかるようになります。サンプルごとのハンドリングによる正規化の必要性を排除し、プロセスの初期段階でサンプルをプールする、合理化されたNGSライブラリ調製技術をご紹介します。この技術により、ワークフローが大幅に簡素化され、データ品質を損なうことなく、ライゲーション後のサンプル処理スループットが最大48倍向上します。このハイスループットなワークフローは、酵素による断片化に基づいて構築され、インラインバーコード付きの新規正規化アダプターを用いてシーケンシング可能なライブラリに変換されます。ライブラリの正規化は、ライゲーションステップ中にアダプターから行われ、qPCRベースのプーリングと同程度に、DNAインプット量に依存しないライブラリ変換（20～200 ng、CV < 20%）を達成します。最大48個のインラインバーコードがアダプターに含まれており、サンプルに均一にライゲーションして、簡単に多重化を解除できます。インラインバーコードの設計により、最大48サンプルをモジュール方式でプールできる柔軟なプーリングが可能です。正規化アダプターとインラインバーコードにより、プーリングはアダプターライゲーション直後に実行され、クリーンアップとPCR反応の回数を大幅に削減します。このフォーマットでは、ライゲーション後のデュアルユニークインデックスシーケンスプライマーを使用して、1回のシーケンスランで最大数万ライブラリまでサポートすることもできます。Finally, multiplexed PCR amplification artifacts can be reduced using this workflow. ライブラリの変換は一貫しており、ローパス全ゲノムシーケンス（WGS）とバリアントコーリング（カバレッジ20倍以上）のためのターゲットシーケンスの両方に適しています。この新しいライブラリ調製プロセスは、新しい技術を応用して、作業時間を短縮し、効率を高めます。かつては各サンプルを個別に処理していたプロセスが、DNAの投入量に依存しない均等な変換を保証しながらプールできるようになりました。このワークフローは、ライブラリ調製の実験プロセスを大幅に進歩させ、シーケンス装置のスループット向上を補完します。