Extracellulära Vesiklar (EVs) är mediatorer av cell-till-cell kommunikation och har terapeutisk potential som naturliga läkemedelsbärare när de förbättras med bioteknisk modifiering. Nyligen dekorerades modifierade EVs med terapeutiska antikroppar och laddades med cytotoxiska läkemedel för att skapa en modulär platform för målriktad cancerterapi. Denna platform, som kallas Fc-EVs, uppnådde cytotiska effekter vid låga doser vilket ledde till förbättrad överlevnad hos möss med melanom. Fc-EVs produceras genom uttryck av ett fusionsprotein betående av ett EV-sorterande domän och ett Fcbindande domän i produktionsceller. I detta arbete utfördes en systematisk screen på kombinationer av EV-sorterande domäner (CD63 WT, CD63 Y235A, TSPAN2, Protein X, PlexinA1) och Fc-bindande domäner (Z, ZZ) utifrån deras förmåga att producera FcEVs, ladda cargo och, i synnerhet, binda antikroppar. Skillnader i antikroppsbindningsförmåga kunde kopplas till membrantopologi, då tetraspaniner fuserade med Z-domänen vid deras stora extracellulära loop presterade bättre än motsvarande ZZ-fusioner. Däremot förbättrade den högre affiniteten hos ZZ-domänen som förväntat bindningen av antikroppar när den fuserades med det singelpasserande membranproteinet Protein X. Två kombinationer, ZZ-Protein X och Z-TSPAN2, överträffade den nuvarande standarden Z-CD63 WT och är starka kandidater för nästa generation av Fc-EVs.