Introduction
Le processus à bas débit, gourmand en ressources, de la caractérisation des variants des anticorps peut constituer un goulot d’étranglement coûteux dans la filière de développement. La production d’anticorps à haut débit Twist est un flux de travail gène-vers-protéine qui décongestionne ce goulot d’étranglement en produisant des dizaines de milliers d’anticorps divers pour cribler des propriétés biophysiques et pharmacocinétiques. La plateforme de synthèse d’ADN sur silicone Twist peut inscrire précisément des milliers de gènes par cycle, ce qui permet de produire rapidement et avec un débit élevé des anticorps pour la recherche et le criblage.
Spécifications du produit
- Anticorps fournis sous forme de protéine purifiée ou de surnageant
- Tous les isotypes majeurs des IgG disponibles : IgG1, IgG2, IgG4, chaînes légères kappa et lambda, et VHH-Fc (IgG1 et IgG2)
- Donne des intervalles entre 15 et 2 000 μg
- Anticorps exprimés dans les cellules HEK-293
Vous avez besoin de développer vos capacités de production d’anticorps pour le dépistage ?
La production d’anticorps à haut débit de Twist permet une expansion immédiate de votre filière de production d’anticorps. Il vous suffit de charger les séquences d’anticorps et de laisser Twist faire le reste.
Introduction
Le processus à bas débit, gourmand en ressources, de la caractérisation des variants des anticorps peut constituer un goulot d’étranglement coûteux dans la filière de développement. La production d’anticorps à haut débit Twist est un flux de travail gène-vers-protéine qui décongestionne ce goulot d’étranglement en produisant des dizaines de milliers d’anticorps divers pour cribler des propriétés biophysiques et pharmacocinétiques. La plateforme de synthèse d’ADN sur silicone Twist peut inscrire précisément des milliers de gènes par cycle, ce qui permet de produire rapidement et avec un débit élevé des anticorps pour la recherche et le criblage.
Spécifications du produit
- Anticorps fournis sous forme de protéine purifiée ou de surnageant
- Tous les isotypes majeurs des IgG disponibles : IgG1, IgG2, IgG4, chaînes légères kappa et lambda, et VHH-Fc (IgG1 et IgG2)
- Donne des intervalles entre 15 et 2 000 μg
- Anticorps exprimés dans les cellules HEK-293
Vous avez besoin de développer vos capacités de production d’anticorps pour le dépistage ?
La production d’anticorps à haut débit de Twist permet une expansion immédiate de votre filière de production d’anticorps. Il vous suffit de charger les séquences d’anticorps et de laisser Twist faire le reste.
Dans la filière de développement des anticorps, les chercheurs font souvent face à un engorgement lors de la transition entre le bio-panning et la caractérisation des anticorps. La caractéristique de haut débit des technologies comme l’exposition sur phage et le séquençage de lymphocytes B uniques permet d’identifier des centaines, voire des milliers d’anticorps potentiellement à haute affinité pour le développement. Une étude plus approfondie de ces résultats nécessite l’expression d’anticorps complets, un processus qui présente souvent un faible débit, est gourmand en ressources et constitue un obstacle important au progrès.
La production d’anticorps à haut débit Twist décongestionne ce goulot d’étranglement en s’appuyant sur l’expertise de Twist en matière de synthèse d’ADN et de production d’anticorps pour produire simultanément des milliers d’anticorps distincts pour le dépistage et la découverte. Avec une production à haut débit d’anticorps en quantités allant de 15 à 2 000 µg, suffisante pour identifier des candidats pour de nouvelles études, Twist fournit un produit de qualité supérieur à un coût raisonnable. Twist utilise le système d’expression transitoire employant HEK-293 pour des rendements fiables, reproductibles et évolutifs. Parce que les rendements de l’expression peuvent varier en fonction de la séquence d’anticorps, Twist utilise et rapporte les résultats des séquences de contrôle pour assurer que la transfection et la production de protéines fonctionnent correctement.
Voici un schéma présentant les rendements types en protéines de la production d’anticorps à haut débit Twist sur une période d’un mois. Brièvement, un anticorps de contrôle a été exprimé de manière recombinante dans des cellules HEK-293 transitoires en transfectant deux gènes clonaux encodant une chaîne lourde et légère correspondante. Après la transfection, les cellules ont été cultivées pendant quatre jours, brièvement centrifugées et les surnageants ont été décantés en colonnes de purification de protéines A/G, avant une analyse quantitative A280. Ces données montrent la qualité que l’on peut attendre du flux de travail de production des anticorps à haut débit Twist.
Pour s’assurer que les anticorps sont « prêts à l’emploi » pour une expérience, le contrôle qualité (CQ) des anticorps purifiés inclut l’analyse quantitative A280, la taille (kDa) et l’analyse du pourcentage de pureté avec une analyse par électrophorèse en gel de polyacrylamide contenant du laurylsulfate de sodium (CE-SDS). Après le CQ, l’anticorps est préparé pour l’expédition, sauf en cas de demande d’échange de tampon ou de normalisation du volume.
Voici les résultats de CQ types générés à l’aide du flux de travail de la production d’anticorps à haut débit Twist. Les crêtes propres en (A) et les bandes propres en (B) montrent que les espèces dans le stock d’anticorps sont de la même taille et de la même charge. La crête de 67 kD représente le segment de chaîne lourde de l’anticorps, tandis que la crête à 29 représente les segments de chaîne légère.
Le protocole autorisé pour le Protein Express LabChip est suivi pour préparer des échantillons dénaturés pour l’analyse de la taille et de la pureté. L’analyse par électrophorèse en gel de polyacrylamide contenant du laurylsulfate de sodium (CE-SDS) est effectuée pour collecter les données de taille comparées à une échelle, similaire à un gel SDS-PAGE pour fournir un poids moléculaire approximatif (kDa), ainsi qu’un pourcentage de pureté pour les chaînes lourdes et légères.
Dans la filière de développement des anticorps, les chercheurs font souvent face à un engorgement lors de la transition entre le bio-panning et la caractérisation des anticorps. La caractéristique de haut débit des technologies comme l’exposition sur phage et le séquençage de lymphocytes B uniques permet d’identifier des centaines, voire des milliers d’anticorps potentiellement à haute affinité pour le développement. Une étude plus approfondie de ces résultats nécessite l’expression d’anticorps complets, un processus qui présente souvent un faible débit, est gourmand en ressources et constitue un obstacle important au progrès.
La production d’anticorps à haut débit Twist décongestionne ce goulot d’étranglement en s’appuyant sur l’expertise de Twist en matière de synthèse d’ADN et de production d’anticorps pour produire simultanément des milliers d’anticorps distincts pour le dépistage et la découverte. Avec une production à haut débit d’anticorps en quantités allant de 15 à 2 000 µg, suffisante pour identifier des candidats pour de nouvelles études, Twist fournit un produit de qualité supérieur à un coût raisonnable. Twist utilise le système d’expression transitoire employant HEK-293 pour des rendements fiables, reproductibles et évolutifs. Parce que les rendements de l’expression peuvent varier en fonction de la séquence d’anticorps, Twist utilise et rapporte les résultats des séquences de contrôle pour assurer que la transfection et la production de protéines fonctionnent correctement.
Voici un schéma présentant les rendements types en protéines de la production d’anticorps à haut débit Twist sur une période d’un mois. Brièvement, un anticorps de contrôle a été exprimé de manière recombinante dans des cellules HEK-293 transitoires en transfectant deux gènes clonaux encodant une chaîne lourde et légère correspondante. Après la transfection, les cellules ont été cultivées pendant quatre jours, brièvement centrifugées et les surnageants ont été décantés en colonnes de purification de protéines A/G, avant une analyse quantitative A280. Ces données montrent la qualité que l’on peut attendre du flux de travail de production des anticorps à haut débit Twist.
Pour s’assurer que les anticorps sont « prêts à l’emploi » pour une expérience, le contrôle qualité (CQ) des anticorps purifiés inclut l’analyse quantitative A280, la taille (kDa) et l’analyse du pourcentage de pureté avec une analyse par électrophorèse en gel de polyacrylamide contenant du laurylsulfate de sodium (CE-SDS). Après le CQ, l’anticorps est préparé pour l’expédition, sauf en cas de demande d’échange de tampon ou de normalisation du volume.
Voici les résultats de CQ types générés à l’aide du flux de travail de la production d’anticorps à haut débit Twist. Les crêtes propres en (A) et les bandes propres en (B) montrent que les espèces dans le stock d’anticorps sont de la même taille et de la même charge. La crête de 67 kD représente le segment de chaîne lourde de l’anticorps, tandis que la crête à 29 représente les segments de chaîne légère.
Le protocole autorisé pour le Protein Express LabChip est suivi pour préparer des échantillons dénaturés pour l’analyse de la taille et de la pureté. L’analyse par électrophorèse en gel de polyacrylamide contenant du laurylsulfate de sodium (CE-SDS) est effectuée pour collecter les données de taille comparées à une échelle, similaire à un gel SDS-PAGE pour fournir un poids moléculaire approximatif (kDa), ainsi qu’un pourcentage de pureté pour les chaînes lourdes et légères.
