Kit NEBNext® EM-seq™ pour l’analyse de méthylation par séquençage ciblé Twist
En partenariat avec New England Biolabs (NEB), Twist propose un nouveau procédé d’analyse de méthylation par séquençage qui améliore la qualité des banques et supprime la nécessité d’un traitement au bisulfite pendant la préparation.
Le procédé comporte une conversion enzymatique des cytosines non méthylées (voir figure) pour identifier les sites de méthyl-cytosine (5mC) et d’hydroxyméthyl-cytosine (5hmC).
La conversion enzymatique permet de produire des banques plus intactes et mieux représentées et, en fin de compte, de détecter la méthylation de manière plus sensible. Le système de préparation des banques est adapté au séquençage du génome entier et à l’enrichissement en aval avec les panels de méthylation Twist.
La conversion EM-seq implique une série d’étapes enzymatiques pour convertir les cytosines non méthylées en uraciles. Le résultat final est le même que celui de la conversion au bisulfite classique, ce qui fait d’EM-seq un outil compatible avec les programmes d’analyse existants faisant appel à Bismark et bwa-meth.