You can find the pricing table for Gene Fragment products in your account by clicking here.

If you need to contact your Account Manager regarding pricing, their contact information is available in eCommerce under Account.

Les méthodes suivantes sont disponibles pour cloner des fragments de gènes avec des adaptateurs :

Restriction digestion/Ligation - place restriction sites inside of the Twist adapters for easy cloning

Type IIS or Golden Gate - place restriction sites inside of the Twist adapters for easy cloning TOPO cloning (blunt-end) - the adapter sequences will be cloned in as well

Gateway cloning - add attB sites to the ends of your sequence

For more information, click here.  

Pour les Adapter-On Gene Fragments, des adaptateurs universels sont synthétisés sur les extrémités de chaque fragment. Les adaptateurs font 21 à 22 nucléotides de long. Les fragments comportant ces adaptateurs sont compatibles avec un certain nombre de méthodes d’assemblage, à savoir digestion/ligation par restriction, Gateway, Golden Gate et clonage TOPO.

Il est possible d’ajouter des sites de restriction dans les adaptateurs pour supprimer des adaptateurs. La méthode de clonage TOPO fonctionne, mais conserve les adaptateurs. 
SÉQUENCES D’ADAPTATEURS

• Pour les commandes reçues avant le 9 août 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
  • Adaptateur 5' : GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
  • Adaptateur 3’ : AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
  • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

• Pour les commandes reçues entre le 9 août 2021 et le 1er novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
  • Adaptateur 5' : CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
  • Adaptateur 3’ : AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
  • 5’ – CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT – insert – AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG – 3’

• Pour les commandes reçues après le 2 novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
  • Adaptateur 5' : CAATCCGCCCTCACTACAACCG
  • Adaptateur 3’ : CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
  • 5’ – CAATCCGCCCTCACTACAACCG – insert – CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA – 3’

*Les adaptateurs sont de courtes séquences ajoutées à chaque extrémité de l’insert dans le cadre de notre procédé de synthèse. Des fragments de gènes sans ces adaptateurs sont également disponibles lors du processus de commande. 

Si vous avez des questions concernant votre commande, veuillez nous contacter à l’adresse suivante customersupport@twistbioscience.com

Oui, les fragments de gènes subissent un nettoyage par billes ; cependant, de petites quantités de fragments courts peuvent être transmises.

• Pour les commandes reçues avant le 9 août 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
  • Adaptateur 5' : GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
  • Adaptateur 3’ : AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
  • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

• Pour les commandes reçues entre le 9 août 2021 et le 1er novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
  • Adaptateur 5' : CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
  • Adaptateur 3’ : AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
  • 5’ – CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT – insert – AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG – 3’

• Pour les commandes reçues après le 2 novembre 2021, les séquences adaptatrices sont les suivantes :
  • Adaptateur 5' : CAATCCGCCCTCACTACAACCG
  • Adaptateur 3’ : CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
  • 5’ – CAATCCGCCCTCACTACAACCG – insert – CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA – 3’

*Les adaptateurs sont de courtes séquences ajoutées à chaque extrémité de l’insert dans le cadre de notre procédé de synthèse. Des fragments de gènes sans ces adaptateurs sont également disponibles lors du processus de commande.

If you have any questions about your order, please contact us at customersupport@twistbioscience.com

La liste suivante répertorie les organismes pris en charge pour l’optimisation des codons sur notre site Web :

• Arabidopsis thaliana
• Aspergillus niger
• Aspergillus oryzae
• Bacillus subtilis
• Brassica napus
• Caenorhabditis elegans
• Cricetulus griseus (CHO)
• Drosophila melanogaster
• Escherichia coli
• Glycine max
• Homo sapiens
• Hypocrea jecorina
• Medicago sativa
• Mus musculus
• Nicotiana tabacum
• Petunia x hybrida
• Pichia pastoris
• Pisum sativum
• Rattus norvegicus
• Saccharomyces cerevisiae
• Solanum tuberosum
• Spodoptera frugiperda
• Streptomyces coelicolor A3(2)
• Sus scrofa
• Toxoplasma gondii
• Xenopus laevis
• Yarrowia lipolytica
• Zea mays

If you do not see your specific organism, contact customersupport@twistbioscience.com

À l’heure actuelle, nous ne sommes pas en mesure de synthétiser des gènes évalués comme étant Impossibles. Plusieurs facteurs font que notre algorithme évalue un gène comme étant Impossible et les paramètres particuliers sont spécifiques à la séquence du gène. Notre algorithme exclusif a été développé en utilisant l’apprentissage machine. Outre l’apprentissage machine, notre algorithme tient compte des facteurs suivants :

• Pourcentage de GC entre 25 et 65 %
• Longueur max. d’homopolymère < 10
• Faible homologie

Une combinaison unique de ce qui précède aboutit à une évaluation de la séquence de gènes spécifique comme étant Impossible.

Pour conserver l’expression protéique sauvage :

• Nous évitons d’utiliser des codons rares (ceux dont la fréquence est < 8 %).
• Nous nous assurons que les séquences ne comportent pas de structures en épingle à cheveux (ΔG < -8) dans les 48 premières paires de bases des séquences résultantes.
• Nous vérifions les deux brins pour nous assurer qu’ils ne contiennent pas de site de restriction enzymatique que vous nous avez demandé d’éviter.
• Nous évitons d’introduire des séquences de promoteurs internes dans les séquences d’expression en évitant de créer des sites de liaison sigma70 forts.
• Nous évitons les séquences qui créent des sites de liaison de ribosome forts (GGAGG et TAAGGAG).
• Nous évitons les séquences qui créent des séquences de terminaison (TTTTT ou AAAAA).

Pour améliorer la probabilité de réussite de la fabrication :

• Nous n’introduisons pas de répétitions d’une longueur supérieure à 20 paires de bases.
• Nous évitons les suites homonucléotidiques de 10 bases ou plus.
• Nous évitons les séquences ajustées qui créent un pourcentage global de GC inférieur à 25 % ou supérieur à 65 % et les fenêtres de GC locales (50 bp) de moins de 35 % ou plus de 65 %.

Veuillez noter que l’optimisation des codons est utile pour améliorer les chances de réussite de la synthèse, pas de l’expression protéique.  

Les problèmes de synthèse sont principalement dus à des structures répétitives, à une teneur en GC extrême et à des homopolymères. Pour déterminer les chances de réussite, nous nous appuyons sur une méthode d’apprentissage automatique. Par conséquent, la plupart du temps, le rejet d’une séquence ne s’explique pas par un motif unique. La complexité ou le rejet résultent plutôt d’un ensemble de caractéristiques qui portent une séquence au-delà d’un certain niveau de complexité. Les seules règles strictes sont les suivantes :

• Éviter les homopolymères >= 14 bp

• Ne pas inclure de CcdB (système toxine-antitoxine de type II)

Si vous faites face à un problème, nous vous recommandons de supprimer ou de minimiser les répétitions, les régions à teneur extrême en GC et les homopolymères. Nous mettrons en évidence les zones préoccupantes si votre séquence s’avère complexe, impossible à construire ou contient des séquences qui entrent en conflit avec nos processus internes.

Une fois que vous aurez envoyé vos séquences de gènes à notre site Web, ces séquences seront automatiquement évaluées pour déterminer la faisabilité de l’assemblage :

Standard: No errors have been found. Il a été déterminé que la séquence de gènes présente globalement une complexité « standard » (par exemple, longueur, teneur en GC, homologie, etc.). 

Complex: No errors have been found. Certaines séquences sont complexes (longueur, teneur en GC, homologie, etc.), mais la synthèse de votre gène ne devrait pas poser de problème. Dans de rares cas, les séquences peuvent être soumises à un délai d’exécution plus long ou à un risque d’échec de production.

Error: Gene sequence contains errors. Veuillez cliquer sur la séquence pour obtenir plus de détails sur la manière de les résoudre.

Not Accepted: The sequence contains elements that make it impossible for us to synthesize. Veuillez consulter les explications détaillées qui accompagnent le message d’erreur ou vous référer aux « Directives de conception ».

À propos du système d’évaluation

Notre système d’évaluation repose sur un modèle d’apprentissage automatique qui analyse et combine plusieurs paramètres de séquence (pourcentage global de GC, longueur maximale des homopolymères, longueur maximale des répétitions, longueur des séquences, densité des répétitions, etc.). Ce modèle a été développé à partir de nos données historiques de production et permet une estimation plus précise du succès de la production de gènes et d’anticorps.

À propos des messages ISSUE

Warnings: Are associated with the risk of failure, predicted by the machine learning model. Un nombre plus élevé d’avertissements est plus susceptible d’entraîner un score « Non accepté ».

Errors: Are not associated with gene complexity, and they can be fixed by correcting the gene design

Notre site Web accepte les séquences d’acides aminés et les convertit en séquences d’ADN à des fins de synthèse.  Sur la page de chargement des séquences, sélectionnez l’option Séquence d’acides aminés.


 Assurez-vous que votre saisie contient uniquement des caractères à une lettre pour les acides aminés. Nous ne prenons en charge que les 20 caractères de codage standard à une lettre.

La présence du signe « * » à la fin de vos séquences d’acides aminés indique un codon de terminaison (nous n’ajoutons pas automatiquement de codon de terminaison).

En fonction du tableau d’utilisation des codons que vous choisissez, les codons les plus fréquemment utilisés seront sélectionnés.            

Si vous ne voyez pas votre organisme spécifique, contactez customersupport@twistbioscience.com pour obtenir de l’aide.

Remarque sur les gènes clonaux : les vecteurs d’expression de Twist ne contiennent pas tous un mécanisme d’expression standard en amont du point d’insertion. We recommend double-checking the sequence of your final plasmid construct by clicking "Download Sequences"after selecting your desired vector. 

Les clients ont le choix entre commander des pools d’oligonucléotides, des fragments de gènes et des gènes clonaux.

Les oligonucléotides (ADN linéaire simple brin) dans des pools d’oligonucléotides ont une taille pouvant aller de 20 bp à 300 bp.

Les fragments de gènes sont de l’ADN linéaire double brin d’une taille pouvant aller de 300 à 5 000 bp (longueur).

Les gènes clonaux sont de l’ADN double brin qui a été cloné dans l’un des vecteurs de Twist ou dans un vecteur personnalisé fourni par le client. La plage de longueurs des gènes clonaux peut aller de 300 à 5 000 bp.