Múltiples bibliotecas de CRISPR centradas a partir de un único grupo de oligonucleótidos

El cribado genético funcional que utiliza el sistema CRISPR/Cas9 es una herramienta potente para interrogar la función genética a escala, pero el acceso a esta tecnología y su implementación están limitados por las bibliotecas de ARNgu CRISPR predefinidas existentes. Aquí, se usó un solo grupo de oligonucleótidos Twist en combinación con la clonación multiplexada de bibliotecas personalizadas (CLUE; crispr-clue.de), un flujo de trabajo de laboratorio húmedo y bioinformática fácil de usar, para generar numerosas bibliotecas de ARNgu personalizadas de alta calidad. La fidelidad excepcional de los grupos de oligonucleótidos Twist conserva la representación uniforme de ARNgu en las bibliotecas CLUE resultantes sin contaminación cruzada de las bibliotecas, por lo que cumple con los estrictos requisitos para el éxito en las aplicaciones de panel de CRISPR.


Cubierto en esta nota de aplicación
Cómo se puede usar CLUE para diseñar múltiples bibliotecas de guías dirigidas
Cómo la calidad de la biblioteca Twist asegura el éxito al desmultiplexar
Un panel CRISPRi dirigido con 100 guías desmultiplexadas de un grupo más grande
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