Después de la clonación, ¿cuántas colonias debo seleccionar para aumentar mis probabilidades de encontrar un clon con mi secuencia correcta?

Para secuencias de complejidad estándar y teniendo en cuenta nuestra tasa de error de 1 entre 7500, la selección del número recomendado de colonias, como se muestra en el gráfico, proporciona una probabilidad del 95 % de encontrar una colonia con la secuencia correcta.

Tenga en cuenta que esta recomendación es un punto de partida. Varios factores, como el tipo de vector, la complejidad de la secuencia y el contenido de la secuencia, pueden afectar al crecimiento de la colonia. En algunos casos, puede ser necesario seleccionar de 2 a 3 veces el número de colonias recomendado.

 

Selección de colonias


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¿Cuál es el precio de un fragmento de gen?

Puede encontrar la tabla de precios para los productos de fragmentos de gen haciendo clic aquí.

Si necesita ponerse en contacto con su administrador de cuentas por algún aspecto relacionado con los precios, encontrará su información de contacto en el sitio de comercio electrónico en Account (Cuenta).


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¿Dónde puedo encontrar un Certificado de análisis (Certificate of Analysis, COA) para un fragmento de gen?

Los Certificados de análisis (Certificates of Analysis, COA) están disponibles para los pedidos completados. Puede encontrar el COA para los productos de fragmentos de gen haciendo clic aquí.


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¿Cuáles son las secuencias de adaptadores que se utilizan en los fragmentos de genes con adaptadores?

  • Para pedidos recibidos antes del 9 de agosto de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
    • Adaptador 3': AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
    • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

 

  • Para pedidos recibidos entre el 9 de agosto de 2021 y el 1 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
    • Adaptador 3': AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
    • 5’-CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT–inserto–AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG-3'

 

  • Para pedidos recibidos después del 2 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': CAATCCGCCCTCACTACAACCG
    • Adaptador 3': CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
    • 5’-CAATCCGCCCTCACTACAACCG–inserto–CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA-3'

 

* Los adaptadores son secuencias cortas añadidas a cada extremo del inserto como parte de nuestro proceso de síntesis. Los fragmentos de gen sin estos adaptadores también están disponibles durante el proceso de pago.

Si tiene preguntas sobre su pedido, póngase en contacto con nosotros mediante [email protected].


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¿Se añaden secuencias de adaptadores a los extremos de mis secuencias?

Para los fragmentos de genes con adaptadores, los adaptadores universales se sintetizan en los extremos de cada fragmento. Los adaptadores tienen una longitud de 21-22 nucleótidos. Los fragmentos con estos adaptadores son compatibles con varios métodos de ensamblaje, a saber, clonación por restricción, digestión/ligadura, puerta de enlace, Golden Gate y TOPO.

La adición de sitios de restricción dentro de los adaptadores se puede utilizar para eliminar los adaptadores. La clonación TOPO funcionará, pero dejará los adaptadores. 

 

SECUENCIAS DE ADAPTADORES

  • Para pedidos recibidos antes del 9 de agosto de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
    • Adaptador 3': AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
    • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

 

  • Para pedidos recibidos entre el 9 de agosto de 2021 y el 1 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
    • Adaptador 3': AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
    • 5’-CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT–inserto–AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG-3'

 

  • Para pedidos recibidos después del 2 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': CAATCCGCCCTCACTACAACCG
    • Adaptador 3': CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
    • 5’-CAATCCGCCCTCACTACAACCG–inserto–CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA-3'

 

* Los adaptadores son secuencias cortas añadidas a cada extremo del inserto como parte de nuestro proceso de síntesis. Los fragmentos de gen sin estos adaptadores también están disponibles durante el proceso de pago. 

Si tiene preguntas sobre su pedido, póngase en contacto con nosotros [email protected]  

 


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¿Qué métodos puedo utilizar para clonar mis fragmentos de genes con adaptadores?

Puede utilizar los siguientes métodos para clonar fragmentos de genes con adaptadores:

Digestión/ligadura de restricción: coloque los sitios de restricción dentro de los adaptadores Twist para facilitar la clonación

Tipo IIS o Golden Gate: coloque los sitios de restricción dentro de los adaptadores Twist para una clonación TOPO sencilla (extremo romo): las secuencias del adaptador también se clonarán

Clonación de puerta de enlace: agregue sitios attB a los extremos de su secuencia

Para obtener más información, haga clic aquí.  


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¿Se purifican los fragmentos de genes?

Sí, los fragmentos de genes pasan por una limpieza basada en microesferas; sin embargo, los fragmentos cortos pueden arrastrarse en pequeñas cantidades.


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Después de la clonación, ¿cuántas colonias debo seleccionar para aumentar mis probabilidades de encontrar un clon con mi secuencia correcta?

Para secuencias de complejidad estándar y teniendo en cuenta nuestra tasa de error de 1 entre 7500, la selección del número recomendado de colonias, como se muestra en el gráfico, proporciona una probabilidad del 95 % de encontrar una colonia con la secuencia correcta.

Tenga en cuenta que esta recomendación es un punto de partida. Varios factores, como el tipo de vector, la complejidad de la secuencia y el contenido de la secuencia, pueden afectar al crecimiento de la colonia. En algunos casos, puede ser necesario seleccionar de 2 a 3 veces el número de colonias recomendado.

 

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¿Cuál es el precio de un fragmento de gen?

Puede encontrar la tabla de precios para los productos de fragmentos de gen haciendo clic aquí.

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¿Dónde puedo encontrar un Certificado de análisis (Certificate of Analysis, COA) para un fragmento de gen?

Los Certificados de análisis (Certificates of Analysis, COA) están disponibles para los pedidos completados. Puede encontrar el COA para los productos de fragmentos de gen haciendo clic aquí.


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¿Cuáles son las secuencias de adaptadores que se utilizan en los fragmentos de genes con adaptadores?

  • Para pedidos recibidos antes del 9 de agosto de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
    • Adaptador 3': AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
    • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

 

  • Para pedidos recibidos entre el 9 de agosto de 2021 y el 1 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
    • Adaptador 3': AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
    • 5’-CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT–inserto–AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG-3'

 

  • Para pedidos recibidos después del 2 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': CAATCCGCCCTCACTACAACCG
    • Adaptador 3': CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
    • 5’-CAATCCGCCCTCACTACAACCG–inserto–CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA-3'

 

* Los adaptadores son secuencias cortas añadidas a cada extremo del inserto como parte de nuestro proceso de síntesis. Los fragmentos de gen sin estos adaptadores también están disponibles durante el proceso de pago.

Si tiene preguntas sobre su pedido, póngase en contacto con nosotros mediante [email protected].


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¿Se añaden secuencias de adaptadores a los extremos de mis secuencias?

Para los fragmentos de genes con adaptadores, los adaptadores universales se sintetizan en los extremos de cada fragmento. Los adaptadores tienen una longitud de 21-22 nucleótidos. Los fragmentos con estos adaptadores son compatibles con varios métodos de ensamblaje, a saber, clonación por restricción, digestión/ligadura, puerta de enlace, Golden Gate y TOPO.

La adición de sitios de restricción dentro de los adaptadores se puede utilizar para eliminar los adaptadores. La clonación TOPO funcionará, pero dejará los adaptadores. 

 

SECUENCIAS DE ADAPTADORES

  • Para pedidos recibidos antes del 9 de agosto de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
    • Adaptador 3': AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
    • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

 

  • Para pedidos recibidos entre el 9 de agosto de 2021 y el 1 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
    • Adaptador 3': AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
    • 5’-CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT–inserto–AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG-3'

 

  • Para pedidos recibidos después del 2 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
    • Adaptador 5': CAATCCGCCCTCACTACAACCG
    • Adaptador 3': CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
    • 5’-CAATCCGCCCTCACTACAACCG–inserto–CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA-3'

 

* Los adaptadores son secuencias cortas añadidas a cada extremo del inserto como parte de nuestro proceso de síntesis. Los fragmentos de gen sin estos adaptadores también están disponibles durante el proceso de pago. 

Si tiene preguntas sobre su pedido, póngase en contacto con nosotros [email protected]  

 


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¿Qué métodos puedo utilizar para clonar mis fragmentos de genes con adaptadores?

Puede utilizar los siguientes métodos para clonar fragmentos de genes con adaptadores:

Digestión/ligadura de restricción: coloque los sitios de restricción dentro de los adaptadores Twist para facilitar la clonación

Tipo IIS o Golden Gate: coloque los sitios de restricción dentro de los adaptadores Twist para una clonación TOPO sencilla (extremo romo): las secuencias del adaptador también se clonarán

Clonación de puerta de enlace: agregue sitios attB a los extremos de su secuencia

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Sí, los fragmentos de genes pasan por una limpieza basada en microesferas; sin embargo, los fragmentos cortos pueden arrastrarse en pequeñas cantidades.


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