Twist Bioscience HQ
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Las aplicaciones de ingeniería de proteínas y de evolución dirigida suelen utilizar la mutagénesis por saturación para crear una biblioteca de variantes para el cribado. Sin embargo, la mutagénesis por saturación por PCR con tendencia a errores (epPCR) presenta sesgos en la amplificación y un acceso incompleto al espacio mutacional de los codones. Las bibliotecas de variantes de saturación de sitio (SSVL) ofrecen una alternativa sintética sin las limitaciones técnicas de la epPCR. Aquí, se comparó el rendimiento de una SSVL Twist con una biblioteca epPCR mediante un análisis de activación de la glucosa en levadura. En comparación con la epPCR, la SSVL generó una mayor representación de variantes al tiempo que también simplificó los pasos de validación posteriores al proporcionar acceso a toda la diversidad de variantes.
