Este protocolo detalla los pasos necesarios para preparar bibliotecas de ADN libre circulante (ADNlc) con identificadores moleculares únicos (UMI). El kit de preparación de bibliotecas de ADNlc Twist contiene nuevos enzimas y tampones que se han reformulado y optimizado para proporcionar las mejores bibliotecas indexadas y amplificadas de su clase que pueden utilizarse en experimentos de secuenciación del genoma completo (WGS) o posteriormente con los kits de enriquecimiento del objetivo Twist, y secuenciarse en sistemas de secuenciación de última generación (NGS) Ilumina. El sistema de adaptador UMI Twist consta de adaptadores UMI Twist y cebadores de índice doble único (UDI) Twist. Este protocolo de preparación de bibliotecas de ADNlc está optimizado para su uso con los kits de enriquecimiento del objetivo Twist y solo debe realizarse con los reactivos especificados o sus equivalentes.