Agotamiento de globina y de ARNr, y preparación de bibliotecas de ARN Twist con el sistema de adaptador UMI

Agotamiento de globina y de ARNr, y preparación de bibliotecas de ARN Twist con el sistema de adaptador UMI

Este protocolo de agotamiento de ARN y preparación de bibliotecas de ARN detalla todos los pasos necesarios para construir bibliotecas de secuenciación en sistemas de secuenciación de última generación (NGS) de Illumina. Los pasos incluyen el agotamiento de los transcritos ribosómicos y de hemoglobina, la conversión del ARN en ADNc bicatenario y la preparación de bibliotecas de ADNc utilizando el sistema de adaptador de identificador molecular único (UMI) Twist. El sistema de adaptador UMI Twist consta de adaptadores UMI Twist y cebadores de índice doble único (UDI) Twist. Este protocolo detalla los pasos para eliminar el ARN ribosómico y la hemoglobina del ARN total con el fin de generar bibliotecas de ADNc amplificadas e indexadas que puedan someterse a la secuenciación del transcriptoma completo. Si se desea, las bibliotecas de transcriptoma completo son compatibles con los flujos de trabajo de enriquecimiento del objetivo Twist. Este protocolo se ha optimizado para su uso con los reactivos especificados y solo debe realizarse con ellos o con sus equivalentes.


Cubierto en este protocolo
Flujos de trabajo de transcriptoma completo
Incluye materiales suministrados por el usuario, notas generales y precauciones
Agotamiento de ARN y preparación de bibliotecas de ARN Twist con el flujo de trabajo de adaptadores UMI
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