Pathwaydesign durch Gensynthese mit 5 kb

Klonierte Gene bis zu 5 kb können verwendet werden, um ganze Stoffwechselwege zu codieren und den Build-Schritt des Design-Build-Test-Zyklus zu vereinfachen.

Der Design-Build-Test-Zyklus ist für metabolische Engineering-Anwendungen von entscheidender Bedeutung, bei denen Forscher Mikroorganismen neu programmieren, um die zu untersuchenden, nicht nativen Moleküle zu produzieren. Die Reprogrammierung von Zellen zur Synthese von Molekülen in Mengen, die zur Reinigung ausreichen, erfordert jedoch häufig viele Iterationen, um lebensfähige Titer zu erzielen. Innovationen, die einen schnellen Design-Build-Test-Zyklus ermöglichen, sind daher sehr gefragt. Als Proof-of-Concept-beschleunigten Workflow für Multi-Gen-Hochdurchsatztests haben wir die Twist Oligonucleotide Synthesis Platform eingesetzt, um Gene mit einer Länge von bis zu 5 kb zu synthetisieren. Mehrere Gene, die am Stoffwechselweg der Carotinoidsynthese beteiligt sind, wurden in ein einziges Plasmid kloniert, und wertvolle Pigmentmoleküle konnten schnell produziert werden.


Inhalt dieses Anwendungshinweises
Design eines Carotinoidsynthese-Stoffwechselwegs für ein E. coli-Gerüst.
Ein einfacher Aufbau des Stoffwechselweges unter Verwendung der Twist Bestell- und Syntheseplattform
Testen der Carotinoidsynthese.
Optimierung des Stoffwechselweges zur Herstellung wertvoller Pigmentmoleküle.
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