You can find the pricing table for Gene Fragment products in your account by clicking here.

If you need to contact your Account Manager regarding pricing, their contact information is available in eCommerce under Account.

Puede utilizar los siguientes métodos para clonar fragmentos de genes con adaptadores:

Restriction digestion/Ligation - place restriction sites inside of the Twist adapters for easy cloning

Type IIS or Golden Gate - place restriction sites inside of the Twist adapters for easy cloning TOPO cloning (blunt-end) - the adapter sequences will be cloned in as well

Gateway cloning - add attB sites to the ends of your sequence

For more information, click here.  

Para los fragmentos de genes con adaptadores, los adaptadores universales se sintetizan en los extremos de cada fragmento. Los adaptadores tienen una longitud de 21-22 nucleótidos. Los fragmentos con estos adaptadores son compatibles con varios métodos de ensamblaje, a saber, clonación por restricción, digestión/ligadura, puerta de enlace, Golden Gate y TOPO.

La adición de sitios de restricción dentro de los adaptadores se puede utilizar para eliminar los adaptadores. La clonación TOPO funcionará, pero dejará los adaptadores. 
SECUENCIAS DE ADAPTADORES

• Para pedidos recibidos antes del 9 de agosto de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
  • Adaptador 5': GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
  • Adaptador 3': AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
  • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

• Para pedidos recibidos entre el 9 de agosto de 2021 y el 1 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
  • Adaptador 5': CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
  • Adaptador 3': AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
  • 5’-CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT–inserto–AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG-3'

• Para pedidos recibidos después del 2 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
  • Adaptador 5': CAATCCGCCCTCACTACAACCG
  • Adaptador 3': CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
  • 5’-CAATCCGCCCTCACTACAACCG–inserto–CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA-3'

* Los adaptadores son secuencias cortas añadidas a cada extremo del inserto como parte de nuestro proceso de síntesis. Los fragmentos de gen sin estos adaptadores también están disponibles durante el proceso de pago. 

Si tiene preguntas sobre el orden, póngase en contacto con nosotros mediante la dirección customersupport@twistbioscience.com.

Sí, los fragmentos de genes pasan por una limpieza basada en microesferas; sin embargo, los fragmentos cortos pueden arrastrarse en pequeñas cantidades.

• Para pedidos recibidos antes del 9 de agosto de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
  • Adaptador 5': GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT
  • Adaptador 3': AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG
  • 5’ – GAAGTGCCATTCCGCCTGACCT – insert – AGGCTAGGTGGAGGCTCAGTG – 3'

• Para pedidos recibidos entre el 9 de agosto de 2021 y el 1 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
  • Adaptador 5': CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT
  • Adaptador 3': AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG
  • 5’-CCCCGTCACCTTTGGCTTATCAGT–inserto–AGTGACATCTGGACGCTAAGACCG-3'

• Para pedidos recibidos después del 2 de noviembre de 2021, las secuencias del adaptador son como sigue:
  • Adaptador 5': CAATCCGCCCTCACTACAACCG
  • Adaptador 3': CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA
  • 5’-CAATCCGCCCTCACTACAACCG–inserto–CTACTCTGGCGTCGATGAGGGA-3'

* Los adaptadores son secuencias cortas añadidas a cada extremo del inserto como parte de nuestro proceso de síntesis. Los fragmentos de gen sin estos adaptadores también están disponibles durante el proceso de pago.

If you have any questions about your order, please contact us at customersupport@twistbioscience.com

Aquí hay una lista de organismos que son compatibles con la optimización de codones en nuestro sitio web:

• Arabidopsis thaliana
• Aspergillus niger
• Aspergillus oryzae
• Bacillus subtilis
• Brassica napus
• Caenorhabditis elegans
• Cricetulus griseus (CHO)
• Drosophila melanogaster
• Escherichia coli
• Glycine max
• Homo sapiens
• Hypocrea jecorina
• Medicago sativa
• Mus musculus
• Nicotiana tabacum
• Petunia x hybrida
• Pichia pastoris
• Pisum sativum
• Rattus norvegicus
• Saccharomyces cerevisiae
• Solanum tuberosum
• Spodoptera frugiperda
• Streptomyces coelicolor A3(2)
• Sus scrofa
• Toxoplasma gondii
• Xenopus laevis
• Yarrowia lipolytica
• Zea mays

If you do not see your specific organism, contact customersupport@twistbioscience.com

Actualmente, no podemos sintetizar genes que son calificados como imposibles. Hay varios factores que hacen que nuestro algoritmo califique un gen como imposible y los parámetros específicos son exclusivos de la secuencia del gen. Nuestro algoritmo está patentado y se ha desarrollado mediante aprendizaje automático. Además del aprendizaje automático, nuestro algoritmo tiene en cuenta los siguientes factores:

• %GC 25-65 %
• Longitud máxima del homopolímero < 10
• Baja homología

Una combinación única de lo anterior es un reflejo de la puntuación de secuencia genética específica de imposible.

Para mantener la expresión de proteínas de tipo salvaje:

• Evitamos el uso de codones raros (aquellos con una frecuencia de codones < 8 %).
• Nos aseguramos de que las secuencias no tengan horquillas fuertes (ΔG < -8) en los primeros 48 pares de bases de las secuencias resultantes.
• Verificamos ambas hebras para asegurarnos de que no contengan los sitios de corte de enzimas que nos pidió que evitáramos.
• Evitamos la introducción de secuencias promotoras internas a las secuencias de expresión evitando la creación de sitios de unión fuerte a sigma70.
• Evitamos secuencias que creen sitios de unión fuerte a ribosomas (GGAGG y TAAGGAG).
• Evitamos secuencias que creen secuencias terminadoras (TTTTT o AAAAA).

Para mejorar la probabilidad de éxito en la fabricación:

• No introduciremos ninguna repetición de más de 20 pares de bases.
• Evitamos series de homopolímeros de 10 o más bases.
• Evitamos secuencias ajustadas que crean un % de GC global de menos del 25 % o de más del 65 % y ventanas de GC locales (50 pb) de menos del 35 % o de más del 65 %.

Tenga en cuenta que la optimización de codones es útil para mejorar las posibilidades de una síntesis exitosa, no la expresión de proteínas.  

Los problemas de síntesis se deben principalmente a la presencia de estructuras repetitivas, contenido de GC extremo y homopolímeros. Utilizamos un método de aprendizaje automático para determinar la probabilidad de éxito. Por este motivo, en la mayoría de los casos no se puede apuntar a una única razón que justifique el rechazo de una secuencia. La complejidad o el rechazo suelen deberse, más bien, a una combinación de características que aportan a una secuencia un determinado nivel de complejidad. Las únicas normas de aplicación estricta son las siguientes:

• Evitar homopolímeros >= 14 bp

• No incluir CcdB (sistema de toxinas-antitoxinas de tipo II)

Si surge algún problema, recomendamos no realizar, o reducir al mínimo, las repeticiones, las regiones con contenido de GC extremo y los homopolímeros. Destacaremos las regiones más problemáticas si su secuencia es compleja, no se puede construir, o contiene secuencias que entran en conflicto con nuestros procesos internos.

Después de enviar sus secuencias de genes a nuestro sitio web, se calificarán automáticamente para determinar la viabilidad del ensamblaje:

Standard: No errors have been found. Se ha determinado que la secuencia del gen es de complejidad general “estándar” (por ejemplo, longitud, contenido de GC, homología, etc.). 

Complex: No errors have been found. Existen algunas complejidades en la secuencia (por ejemplo, longitud, contenido de GC, homología, etc.), pero no se prevé ningún problema para sintetizar su gen. En raras ocasiones, las secuencias pueden experimentar un aumento del tiempo de entrega o riesgo de fallo de fabricación.

Error: Gene sequence contains errors. Haga clic en la secuencia para obtener más detalles sobre cómo resolverlos.

Not Accepted: The sequence contains elements that make it impossible for us to synthesize. Vea las explicaciones detalladas que acompañan al mensaje de error o consulte las “Directrices de diseño”.

Acerca del sistema de puntuación

Nuestro sistema de puntuación adopta un modelo de aprendizaje automático que analiza y combina múltiples parámetros de secuencia (es decir, porcentaje global de GC, longitud máxima de homopolímero, longitud máxima de repetición, longitud de secuencia, densidad de repetición, etc.). Este modelo se ha entrenado utilizando nuestros datos históricos de fabricación y proporciona una estimación más precisa del resultado satisfactorio de la producción de genes y anticuerpos.

Acerca de los mensajes de PROBLEMAS

Warnings: Are associated with the risk of failure, predicted by the machine learning model. Cuanto mayor sea el número de advertencias, mayor será la probabilidad de obtener una puntuación de “No aceptada”.

Errors: Are not associated with gene complexity, and they can be fixed by correcting the gene design

Nuestro sitio web aceptará secuencias de aminoácidos y las convertirá en una secuencia de ADN para su síntesis. En la página de carga de secuencias, seleccione la opción Amino Acid Sequence (Secuencia de aminoácidos).


 Asegúrese de que su entrada solo contenga caracteres de una letra para los aminoácidos. Solo admitimos los 20 caracteres de código estándar de una letra.

Un “ * ” al final de las secuencias de aminoácidos marca un codón de detención (no agregamos codones de detención automáticamente).

Se seleccionarán los codones utilizados con más frecuencia, en función de la tabla de uso de codones que elija.            

Si no ve su organismo específico, contacte con customersupport@twistbioscience.com para obtener ayuda.

Nota para genes clonados: No todos los vectores de expresión Twist contienen maquinaria de expresión estándar antes del punto de inserción. We recommend double-checking the sequence of your final plasmid construct by clicking "Download Sequences"after selecting your desired vector. 

Los clientes tienen la opción de solicitar grupos de oligonucleótidos, fragmentos de genes y genes clonados.

El tamaño de los oligonucleótidos (ADN monocatenario lineal) en un grupo de oligonucleótidos puede variar de 20 pb a 300 pb.

Los fragmentos de genes son ADN bicatenario lineal que puede variar en tamaño entre 300 pb y 5000 pb de longitud.

Los genes clonados son ADN bicatenario que se ha clonado en uno de los vectores Twist o en un vector personalizado proporcionado por el cliente. Los genes clonados pueden variar en tamaño entre 300 pb y 5000 pb de longitud.