一般

遺伝子の製造に関して違いはありません。また品質に関しても違いはありませんので、お客様のお好みの形式でご注文ください。保管のしやすさのため、プレートよりもチューブを希望されるお客様がいらっしゃいます。一方で、ハイスループットなワークフローを採用しているという理由で、プレートを希望されるお客様もいらっしゃいます。ただし、10 個以上の遺伝子をご注文の際にチューブでの納品をご希望されますと、一律 50 ドルの追加料金がかかりますのでご注意ください。

Gene Fragments の場合（アダプターのありなしに関わらず）、フラグメントのお好みのベクターへのクローニングを容易にするために、各フラグメントの両末端に独自の制限部位を追加することをお勧めしています。

Clonal Genes の場合は、ベクターバックボーンへのクローニングをご希望される、ご自身のインサート配列のみをご提出ください。Twist では、ホモロジーベースの独自のクローニング手法を用いて Clonal Genes をアセンブルし、相同性の高いオーバーハング配列を設計・追加しています。そのため、お客様にインサートの設計にあたり、クローニングしやすさを考慮していただく必要はございません。

ただし、Twist の Cloning ベクターには、インサートに隣接する位置に制限部位はございませんのでご注意ください。これにより、柔軟なデザインが可能となり、後のワークフローで使用する目的で、ご希望通りの制限部位をインサートに隣接した位置に追加することができます。

Twistの発現ベクターの挿入箇所は、2つの制限部位で示されています。これらの制限部位は、最終的に構成する際に、挿入箇所の真横に完全に保存されます。デザインページの「Download sequences」ボタンをクリックして、最後に配列の構成を確認することをお勧めします。 製造段階に移行した注文は、いかなる方法でも変更することはできません。

Twist はすべての Clonal Genes（プラスミド DNA）合成製品について、NGS で配列の検証を行っています。

一方、Gene Fragments（二本鎖 DNA 断片）については NGS での検証は行っていません。遺伝子合成のエラー率は低いことから、お客様のもとで完璧なクローンの配列を 99% の信頼性で確認するには、600 bp、1,200 bp、1,800 bp の Gene Fragments に対して、それぞれおおよそ 3 つ、4 つ、6 つのコロニーについてシーケンス解析する必要があると考えられます。

Twist Bioscience では、DNA 製品を乾燥させた状態や、2 mL マイクロ遠心チューブ、96 ウェルプレートまたは 384 ウェルプレートに再懸濁させた状態で出荷しています。乾燥させた DNA は常温で、再懸濁させた DNA は冷凍で出荷されます。

二本鎖 DNA および一本鎖オリゴヌクレオチドは、ほとんどのラボで採用されている標準的な保存条件において安定です。しかし、Twist Bioscience で合成された DNA の品質を高い状態に保つには、以下のような最善の環境下での保管を考慮することが大切です。

• Twist は、乾燥ペレット状の DNA について、以下の保管条件に応じた期間内にお使いいただくことを推奨しています。
  • 室温で 3 ヶ月
  • 4 °Cで 12 ヶ月
  • −20 °C で 24 ヶ月
  • −80 °C で長期保存
• 再懸濁のガイドライン
  • 再懸濁させる場合は、開封前にチューブまたはプレートを軽く遠心分離機にかけ、ヌクレアーゼフリーの Tris-EDTA（TE）バッファー（pH 8.0）または 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）で目的の濃度に再懸濁させます。
  • ストック溶液（希釈液）の濃度は 10 ng/μL 以上を推奨しますが、ご希望の用途に応じて最適な濃度を決定してください。
  • ストック溶液とは別に必要量ずつ分注して保存すると、コンタミネーションを防ぎ、凍結・融解のサイクルを減らすことができます。調製後の分注液はできるだけ早く使用し、高温に長くさらさないようにご注意ください。
• 再懸濁させた DNA
  • 製品によっては再懸濁させた状態でお届けすることが可能です。お客様からご注文をいただいた DNA は、以下のいずれかのバッファーに再懸濁させた状態でお届けします。開封前にチューブやプレートを軽く遠心分離機にかけることを推奨します。
    • 溶出バッファー（2 mM Tris-Cl（pH 8.5））
    • TE バッファー（10 mM Tris-Cl（pH 8.0）、1 mM EDTA）
    • 低 EDTA TE バッファー（10 mM Tris-Cl（pH 8.0）、0.1 mM EDTA）
    • 水       
      • 水での長期保存はおすすめしません。
  • Twist は、再懸濁させた DNA については保管条件に応じて以下の期間内にお使いいただくことを推奨します。
    • 室温で 3 ヶ月
    • 4 °Cで 12 ヶ月
    • −20 °C で 24 ヶ月
    • −80 °C で長期保存

クローニングされた遺伝子を注文する際、ユーザーはお支払い時に、プラスミド調製の一環として提供される DNA の質量を指定するオプションを選択できます。質量は自動的に測定され、ユーザーに対して保証されます。1 回の調製で必要な質量に達しない場合は、必要な質量に達するまで追加で調製を行います。

現在、Gene Fragments（直鎖状二本鎖 DNA）の最大鎖長は 5 kb です。Clonal Genes（ベクターにクローニングされた遺伝子）の最大鎖長は 5 kb です。

Twist の DNA 製品は乾燥ペレットの状態で、96／384 ウェルプレートまたは 2 ml マイクロ遠心チューブで出荷されます。二本鎖 DNA は標準的な保存条件において安定ですが、 DNA を高い品質で維持するために、再懸濁や保存については以下を推奨します。

• 受領後、チューブまたはプレートを軽く遠心分離機にかけ、 DNA をヌクレアーゼフリーの Tris-EDTA（TE）バッファー（pH 8.0）または 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）にご希望の濃度で再懸濁します。
• 水に再懸濁することはお控えください。
• ストック溶液の濃度は少なくとも 10 ng/μl を推奨しますが、ご希望の用途に応じて最適な濃度を決定してください。
• 作業用にはストック溶液とは別に必要量ずつ分注して保存していただくと、コンタミネーションの可能性を抑え、凍結・融解のサイクルを減らすことができます。
• 長期保存する場合、保存期間が 1 年以内の場合は DNA を −20 °C、さらに長期間保存する場合は DNA を −80 °Cで保存してください。

再懸濁ガイドラインはこちらです。

遺伝子製品は、特に指定のない限り、通常は乾燥ペレットの状態で納品されます。

Clonal Genes は、Twist のカタログベクターまたはお客様独自のカスタムベクターにクローニングした状態で納品されます。Gene Fragments は、直鎖二本鎖配列として納品されます（アダプターの有無はご選択ください）。

これらの遺伝子配列は 96 ウェルプレートまたは 384 ウェルプレートにて納品します。少量のご注文（10 種類未満）の場合、追加料金なしで遺伝子をチューブで納品することも可能です。10 種類以上の遺伝子をご注文の場合、チューブでの納品には 1 回のご注文につき 50 ドルの追加料金がかかります。

Twist Bioscienceは、当社がU.S. Office of Science and Technology Policy (OSTP) Framework for Nucleic Acid Synthesis Screening（アメリカ大統領府科学技術政策局核酸の合成スクリーニングフレームワーク）のすべての要件を遵守していることを証言します。証言のダウンロードはこちらから。

Clonal Genes （プラスミド DNA）の保証最低収量は 50 ng です。NGS による配列検証の結果、その最低収量を満たせない場合がまれにありますが、その場合でも回収できたものはすべて出荷します。

そのようなコンストラクトについては、収量が「NA」と記載されます。バクテリアへの形質転換によって、コンストラクトの回収を試みることができます（詳しくはカスタマーサポートにお問い合わせください）。なお、保証最低収量に満たないコンストラクトについては、料金は請求されません。

アダプター付き Gene Fragments の場合、納期は 2 ～ 4 営業日、アダプターなし Gene Fragments の場合、 4 ～ 8 営業日です。

Clonal Genes の場合、Express の納期は 4 ～ 7 営業日、Standard の納期は 10 営業日です。

Clonal Genes の納品スケジュールは、合成とクローニングが正常に完了するまでの時間を基準にしています。遺伝子がいずれかの工程で失敗した場合、リカバリープロセスに入るため納期が遅れる可能性があります。また、オプションサービス（より高い収量など）をご要望いただいた場合は、追加で納期が発生する場合があります。

伝染性ウシ疾患の発生リスクのない製造工程を確保するため、Twist はクローニング、形質転換、スケールアップ、精製のプロセス全体において、非動物由来材料を用いて製造された精製 DNA 構築物を提供しています。

NGS 製品の安全データシート（SDS）のみ当社ウェブページに掲載しています。合成生物学製品の SDS につきましては、[email protected] までメールでお問い合わせください。

お客様がご自身のアカウントにログインすると、すべての注文について、プレートマップ情報をダウンロードできます。

メインページから「Order & Drafts」をクリックし、「Past Orders」をクリックします。 Twist でのすべての注文が表示されますので、確認したい注文をクリックすると、「Delivered」タブ内にプレートマップをダウンロードするためのリンクが表示されます。

現在、 Twist の遺伝子合成製品（Gene Fragments または Clonal Genes）の最小鎖長は 300 bp です。

Gene Fragments は、アセンブリ後にフラグメント解析でサイズと純度を確認します。配列の検証は行われません。したがって、Gene Fragments はノンクローナルな状態です（完全な配列と、そうでないものが混在しています）。そのため、遺伝子断片をクローニングする場合は、複数のクローンから選抜することが重要です。Gene Fragments は、300 ～ 5,000 bp の範囲で合成できます。

一方、Clonal Genes はアセンブリ後、カスタムベクターまたは Twist のカタログベクターのいずれかにクローニングされます。その後、クローンは NGS で配列検証され、ご依頼通りの配列のみが出荷・納品されます。Clonal Genes は、300 ～ 5,000 bp の範囲で合成できます。

Gene Fragments（二本鎖 DNA 断片）につきましては、1 断片あたり 100 ～ 1000 ng の収量を保証します。

Clonal Genes（プラスミド DNA）につきましては、さまざまな収量のオプションがあります。

• マイクロプレップ：1 µg - 4 µg per clone
• ミニプレップ：4 µg - 10 µg per clone
• ミディプレップ：10 µg ～ 100 µg / クローン
• マキシプレップ：100 µg ～ 1 mg / クローン

ご依頼の配列（Clonal Genes の場合はベクターも）によっては、収量が少なくなる場合があります。収量が異常に低い場合、それが影響して遺伝子が機能しない可能性があります。Please note that sequences that fail for this reason will still ship, but you will not be charged. Customized target yield for miniprep scale is also available.

遺伝子の製造に関して違いはありません。また品質に関しても違いはありませんので、お客様のお好みの形式でご注文ください。保管のしやすさのため、プレートよりもチューブを希望されるお客様がいらっしゃいます。一方で、ハイスループットなワークフローを採用しているという理由で、プレートを希望されるお客様もいらっしゃいます。ただし、10 個以上の遺伝子をご注文の際にチューブでの納品をご希望されますと、一律 50 ドルの追加料金がかかりますのでご注意ください。

Gene Fragments の場合（アダプターのありなしに関わらず）、フラグメントのお好みのベクターへのクローニングを容易にするために、各フラグメントの両末端に独自の制限部位を追加することをお勧めしています。

Clonal Genes の場合は、ベクターバックボーンへのクローニングをご希望される、ご自身のインサート配列のみをご提出ください。Twist では、ホモロジーベースの独自のクローニング手法を用いて Clonal Genes をアセンブルし、相同性の高いオーバーハング配列を設計・追加しています。そのため、お客様にインサートの設計にあたり、クローニングしやすさを考慮していただく必要はございません。

ただし、Twist の Cloning ベクターには、インサートに隣接する位置に制限部位はございませんのでご注意ください。これにより、柔軟なデザインが可能となり、後のワークフローで使用する目的で、ご希望通りの制限部位をインサートに隣接した位置に追加することができます。

Twistの発現ベクターの挿入箇所は、2つの制限部位で示されています。これらの制限部位は、最終的に構成する際に、挿入箇所の真横に完全に保存されます。デザインページの「Download sequences」ボタンをクリックして、最後に配列の構成を確認することをお勧めします。 製造段階に移行した注文は、いかなる方法でも変更することはできません。

Twist はすべての Clonal Genes（プラスミド DNA）合成製品について、NGS で配列の検証を行っています。

一方、Gene Fragments（二本鎖 DNA 断片）については NGS での検証は行っていません。遺伝子合成のエラー率は低いことから、お客様のもとで完璧なクローンの配列を 99% の信頼性で確認するには、600 bp、1,200 bp、1,800 bp の Gene Fragments に対して、それぞれおおよそ 3 つ、4 つ、6 つのコロニーについてシーケンス解析する必要があると考えられます。

Twist Bioscience では、DNA 製品を乾燥させた状態や、2 mL マイクロ遠心チューブ、96 ウェルプレートまたは 384 ウェルプレートに再懸濁させた状態で出荷しています。乾燥させた DNA は常温で、再懸濁させた DNA は冷凍で出荷されます。

二本鎖 DNA および一本鎖オリゴヌクレオチドは、ほとんどのラボで採用されている標準的な保存条件において安定です。しかし、Twist Bioscience で合成された DNA の品質を高い状態に保つには、以下のような最善の環境下での保管を考慮することが大切です。

• Twist は、乾燥ペレット状の DNA について、以下の保管条件に応じた期間内にお使いいただくことを推奨しています。
  • 室温で 3 ヶ月
  • 4 °Cで 12 ヶ月
  • −20 °C で 24 ヶ月
  • −80 °C で長期保存
• 再懸濁のガイドライン
  • 再懸濁させる場合は、開封前にチューブまたはプレートを軽く遠心分離機にかけ、ヌクレアーゼフリーの Tris-EDTA（TE）バッファー（pH 8.0）または 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）で目的の濃度に再懸濁させます。
  • ストック溶液（希釈液）の濃度は 10 ng/μL 以上を推奨しますが、ご希望の用途に応じて最適な濃度を決定してください。
  • ストック溶液とは別に必要量ずつ分注して保存すると、コンタミネーションを防ぎ、凍結・融解のサイクルを減らすことができます。調製後の分注液はできるだけ早く使用し、高温に長くさらさないようにご注意ください。
• 再懸濁させた DNA
  • 製品によっては再懸濁させた状態でお届けすることが可能です。お客様からご注文をいただいた DNA は、以下のいずれかのバッファーに再懸濁させた状態でお届けします。開封前にチューブやプレートを軽く遠心分離機にかけることを推奨します。
    • 溶出バッファー（2 mM Tris-Cl（pH 8.5））
    • TE バッファー（10 mM Tris-Cl（pH 8.0）、1 mM EDTA）
    • 低 EDTA TE バッファー（10 mM Tris-Cl（pH 8.0）、0.1 mM EDTA）
    • 水       
      • 水での長期保存はおすすめしません。
  • Twist は、再懸濁させた DNA については保管条件に応じて以下の期間内にお使いいただくことを推奨します。
    • 室温で 3 ヶ月
    • 4 °Cで 12 ヶ月
    • −20 °C で 24 ヶ月
    • −80 °C で長期保存

クローニングされた遺伝子を注文する際、ユーザーはお支払い時に、プラスミド調製の一環として提供される DNA の質量を指定するオプションを選択できます。質量は自動的に測定され、ユーザーに対して保証されます。1 回の調製で必要な質量に達しない場合は、必要な質量に達するまで追加で調製を行います。

現在、Gene Fragments（直鎖状二本鎖 DNA）の最大鎖長は 5 kb です。Clonal Genes（ベクターにクローニングされた遺伝子）の最大鎖長は 5 kb です。

Twist の DNA 製品は乾燥ペレットの状態で、96／384 ウェルプレートまたは 2 ml マイクロ遠心チューブで出荷されます。二本鎖 DNA は標準的な保存条件において安定ですが、 DNA を高い品質で維持するために、再懸濁や保存については以下を推奨します。

• 受領後、チューブまたはプレートを軽く遠心分離機にかけ、 DNA をヌクレアーゼフリーの Tris-EDTA（TE）バッファー（pH 8.0）または 10 mM Tris-HCl（pH 8.0）にご希望の濃度で再懸濁します。
• 水に再懸濁することはお控えください。
• ストック溶液の濃度は少なくとも 10 ng/μl を推奨しますが、ご希望の用途に応じて最適な濃度を決定してください。
• 作業用にはストック溶液とは別に必要量ずつ分注して保存していただくと、コンタミネーションの可能性を抑え、凍結・融解のサイクルを減らすことができます。
• 長期保存する場合、保存期間が 1 年以内の場合は DNA を −20 °C、さらに長期間保存する場合は DNA を −80 °Cで保存してください。

再懸濁ガイドラインはこちらです。

遺伝子製品は、特に指定のない限り、通常は乾燥ペレットの状態で納品されます。

Clonal Genes は、Twist のカタログベクターまたはお客様独自のカスタムベクターにクローニングした状態で納品されます。Gene Fragments は、直鎖二本鎖配列として納品されます（アダプターの有無はご選択ください）。

これらの遺伝子配列は 96 ウェルプレートまたは 384 ウェルプレートにて納品します。少量のご注文（10 種類未満）の場合、追加料金なしで遺伝子をチューブで納品することも可能です。10 種類以上の遺伝子をご注文の場合、チューブでの納品には 1 回のご注文につき 50 ドルの追加料金がかかります。

Twist Bioscienceは、当社がU.S. Office of Science and Technology Policy (OSTP) Framework for Nucleic Acid Synthesis Screening（アメリカ大統領府科学技術政策局核酸の合成スクリーニングフレームワーク）のすべての要件を遵守していることを証言します。証言のダウンロードはこちらから。

Clonal Genes （プラスミド DNA）の保証最低収量は 50 ng です。NGS による配列検証の結果、その最低収量を満たせない場合がまれにありますが、その場合でも回収できたものはすべて出荷します。

そのようなコンストラクトについては、収量が「NA」と記載されます。バクテリアへの形質転換によって、コンストラクトの回収を試みることができます（詳しくはカスタマーサポートにお問い合わせください）。なお、保証最低収量に満たないコンストラクトについては、料金は請求されません。

アダプター付き Gene Fragments の場合、納期は 2 ～ 4 営業日、アダプターなし Gene Fragments の場合、 4 ～ 8 営業日です。

Clonal Genes の場合、Express の納期は 4 ～ 7 営業日、Standard の納期は 10 営業日です。

Clonal Genes の納品スケジュールは、合成とクローニングが正常に完了するまでの時間を基準にしています。遺伝子がいずれかの工程で失敗した場合、リカバリープロセスに入るため納期が遅れる可能性があります。また、オプションサービス（より高い収量など）をご要望いただいた場合は、追加で納期が発生する場合があります。

伝染性ウシ疾患の発生リスクのない製造工程を確保するため、Twist はクローニング、形質転換、スケールアップ、精製のプロセス全体において、非動物由来材料を用いて製造された精製 DNA 構築物を提供しています。

NGS 製品の安全データシート（SDS）のみ当社ウェブページに掲載しています。合成生物学製品の SDS につきましては、[email protected] までメールでお問い合わせください。

お客様がご自身のアカウントにログインすると、すべての注文について、プレートマップ情報をダウンロードできます。

メインページから「Order & Drafts」をクリックし、「Past Orders」をクリックします。 Twist でのすべての注文が表示されますので、確認したい注文をクリックすると、「Delivered」タブ内にプレートマップをダウンロードするためのリンクが表示されます。

現在、 Twist の遺伝子合成製品（Gene Fragments または Clonal Genes）の最小鎖長は 300 bp です。

Gene Fragments は、アセンブリ後にフラグメント解析でサイズと純度を確認します。配列の検証は行われません。したがって、Gene Fragments はノンクローナルな状態です（完全な配列と、そうでないものが混在しています）。そのため、遺伝子断片をクローニングする場合は、複数のクローンから選抜することが重要です。Gene Fragments は、300 ～ 5,000 bp の範囲で合成できます。

一方、Clonal Genes はアセンブリ後、カスタムベクターまたは Twist のカタログベクターのいずれかにクローニングされます。その後、クローンは NGS で配列検証され、ご依頼通りの配列のみが出荷・納品されます。Clonal Genes は、300 ～ 5,000 bp の範囲で合成できます。

Gene Fragments（二本鎖 DNA 断片）につきましては、1 断片あたり 100 ～ 1000 ng の収量を保証します。

Clonal Genes（プラスミド DNA）につきましては、さまざまな収量のオプションがあります。

• マイクロプレップ：1 µg - 4 µg per clone
• ミニプレップ：4 µg - 10 µg per clone
• ミディプレップ：10 µg ～ 100 µg / クローン
• マキシプレップ：100 µg ～ 1 mg / クローン

ご依頼の配列（Clonal Genes の場合はベクターも）によっては、収量が少なくなる場合があります。収量が異常に低い場合、それが影響して遺伝子が機能しない可能性があります。Please note that sequences that fail for this reason will still ship, but you will not be charged. Customized target yield for miniprep scale is also available.