ベクターが以下の要件を満たしていることをご確認ください。

• ベクター容量：≧ 100 μL（プラスミドはろ紙に載せて提出することはできません）
• ベクター濃度：≧ 100 ng/μL
• ベクター総量：10 μg
• 大腸菌の複製起点を有すること（低コピーではない）
• クローン性集団であること
• 環状（閉環）であること
• 抗生物質耐性マーカーを有すること
• 挿入部位から 40 bp の範囲内に 9 bp を超えるホモポリマー／反復配列を含まないこと
• 反復配列：挿入部位から 19 bp 超以降の上流および下流では、最低 40 bp のユニーク配列を含むこと（直接または逆位反復配列を含まないこと）
• 最終的な遺伝子産物には ccdB（致死性遺伝子）が含まれないこと
• 挿入部位から 50 bp 以内の制限酵素部位で切断できること
• BSL-1（バイオセーフティレベル１）対応であること

抗生物質耐性：

プラスミドには、以下の大腸菌の抗生物質耐性マーカーのいずれかが含まれている必要があります。標準的な濃度は以下の通りです。

抗生物質	製造時の標準的濃度（μg/mL）
Kan	50
AMP	100
CHLOR	25
APRA	50
SPEC	100
TET	10
ZEO	50
BLAST	100

細胞株（大腸菌）   

• Twist で利用可能な細胞株        
• DH10Beta と同様のクローニング株   
• Stbl3 と同様な（37 ℃で増殖可能な）株        

コピー数            

複製起点を構造に含むもののみ利用可能です。

Twist の定義	受付の可否	例
高	はい	ColE1/pMB1/pBR322/pUC
中	はい（ミニプレップ収量は減少）	p15A
低	いいえ	pSC101

増殖条件 

• 標準的な温度：37 ℃／30 ℃   
• 標準的な時間：一晩／24 時間         
• LB-Lennox 上に播種、16 時間／24 時間増殖させた後、コロニーが自動化処理に適した大きさに到達している必要があります。